CY5.5-choline，花菁染色剂CY5.5标出胆碱的自动合成布骤

Cy5.5-Choline 是由胆碱（Choline, HO–CH2–CH2–N+(CH3)3）与近红外染料Cy5.5偶联而成的荧光探针。胆碱是一种小分子季铵盐，存在于生物体系中，分子含有一个羟基和带正电的三甲胺基团，具有亲水性和生物活性。通过与Cy5.5偶联，能够实现对胆碱相关分子过程的荧光可视化。

碳原子设计的概念胆碱设备构造小而，带正自由电荷，间接偶联到Cy5.5促使可以改善染色剂的水阴离子型。偶电信常进行胆碱的羟基与Cy5.5-NHS ester或Cy5.5-异硫氰酸酯等抗逆性基团体现提取碳酸酯或氨基甲酸酯键。别的种行为是先将胆碱与琥铂酸酐体现，建立羧基后与Cy5.5-NHS偶联。生成方法步骤胆碱滋养装饰将胆碱不溶无水吡啶或DMF中，加入到虎珀酸酐，在制冷至40 ℃下发生反应，自动生成胆碱-虎珀酸酯。该过程使胆碱原子核加入羧基，尽可能使与染色剂偶联。粗化合物经萃取原理与柱层析转移，得出带羧基的胆碱研究物。外向酯制取胆碱-琥铂酸酯在DMF里加入EDC·HCl与NHS，添加胆碱-NHS ester中央体。该中央体需要符合无水、惰性环境下如何快速动用，当心止淀粉水解。与CY5.5偶联将CY5.5-amine或CY5.5-NH2溶解于DMF，比较慢进入胆碱-NHS ester水溶液，在典型的含碱标准（DIPEA会存在下）下搅伴表现12–24h。使用酰胺键或碳酸酯键实现了共价依照，实现Cy5.5-choline。纯化工作的反应混杂物经旋蒸去萃取剂后，使用量物溶解甲醇/水饱和溶液，采取除盐处理。终结果确认配制型HPLC纯化，C18柱风险管理体系下为水/乙腈梯度方向洗刷。CY5.5的近红外吸收率（675 nm）能作为监测移动信号，获取纯结果多组分，冻干能够深颜色咖啡豆。分析方法UV-Vis：出现类型CY5.5吸附峰（~675 nm）。荧光光谱仪：促进在675 nm，发送在695–710 nm，与Cy5.5相符。质谱：原子核阴离子峰证实偶联货物原子核量。NMR：内见胆碱三级甲等胺卫星数据信息与Cy5.5果香卫星数据信息，羟栽培基质子不见，就说明偶联出色。HPLC：单峰说明溶解度>95%。总结结尾Cy5.5-Choline 的综合以胆碱的羟基为遮盖位点，认定虎珀硝化作用导入接触臂，再与Cy5.5偶联。该测试探针综合了胆碱的生物技术特点和CY5.5的光学仪器功能，纯化依赖感于HPLC，表现可由光谱分析学与质谱认定。此项终产物在创设荧光标示胆碱诞生物技术与探讨胆碱分解的研究中含有更重要意义上。

产品名称：CY5.5-choline，花菁颜料CY5.5图标胆碱

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