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CY5-Agmatine,花菁染料CY5标记亚精胺的纯化步骤
发布时间:2025-09-23     作者:axc   分享到:
CY5-Agmatine,花菁颜料CY5标记图片亚精胺的纯化步驟亚精胺(Agmatine, 4-胍基丁胺)不是种有着的小氧碳原子多胺,含有块个尾端胍基和某个伯胺,氧碳原子量约为 130 Da。它在肿瘤细胞内具备有的调节走势转导和周围神经递质功用的功用。将亚精胺与花菁颜料 Cy5 偶联,也能导致荧光检测器(Cy5-Agmatine),用到氧碳原子搜寻和活体影像实验。其生成布骤正确:工业原料预备选购高饱和度亚精胺稀盐酸盐,先将中间和转成氧化钙含量胺的形式。一般说来用碳酸氢钠或三乙胺(TEA)改善 pH,使伯胺会进入亲核反响。Cy5-NHS ester 或 Cy5-可溶性酯则可溶性高,溶于水的于皮肤干燥的二甲基亚砜(DMSO)或二甲基甲酰胺(DMF),以不要油脂水解灭活。偶联不起作用将游离子亚精胺盐液体慢慢参加 Cy5-NHS ester 盐液体中。反映实现伯胺对 NHS 酯的亲核普攻,提取固定的酰胺键。该的流程大多数在常温條件下做出,混和 6–12 分钟,pH 把握在 7.5–8.5,以确认亚精胺伯胺的活性酶,时候逃避胍基的副反映。反映的流程中需遮光实操,以提高 Cy5 光增白。结束反應反應迟钝截止后,需加入适当工业乙醇胺或 Tris 加载液封闭型残留物 NHS 酯,以防未反應迟钝的 Cy5 对前因后果选用会造成干忧。纯化过程是因为生理表现混和物中已经含有未生理表现的 Cy5 和副有机物,大多数用到下办法纯化:透析法(氧氧分子量挪作他用膜 1–3 kDa)避开自由小氧氧分子;提高效率色谱仪色谱(HPLC)依据疏丙烯酸乳液的差异分割 Cy5-Agmatine;冻干正确处理赢得澄净粉末状原材料。终产物研究方法UV-Vis 光谱仪显示信息 640–650 nm 的 Cy5 结构特征降解峰;荧光光谱图鼓励光谱约 649 nm,使用峰在 670 nm 附进;质谱(ESI-MS 或 MALDI-TOF)呈现原子量较未遮盖亚精胺加剧约 700–800 Da;NMR 可查证伯胺转换为酰胺的化学工业位移变化规律。保存前提

Cy5-Agmatine 应避光、低温(−20 ℃)冻干保存。溶液状态可短期储存在 4 ℃,避免反复冻融以维持荧光活性。

产品名称:CY5-Agmatine,花菁颜料CY5标记符号亚精胺

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