iFluor 594 Styramide，iFluor 594 酪胺的合成步骤概述
iFluor 594 Styramide，iFluor 594 酪胺的镶嵌操作步骤介绍
iFluor 594 Styramide 是由高性能荧光染料 iFluor 594 与酪胺（tyramine）偶联而成的荧光底物，光谱性质与 Alexa Fluor 594 接近，是一种发射在可见红光区的荧光探针。其典型激发峰约 590 nm，发射峰约 615–620 nm，亮度高、光稳定性强、抗漂白能力优于传统罗丹明类染料，并在中性至弱酸/弱碱条件下保持稳定信号。与 iFluor 488、647 等形成光谱区分，可用于多重标记。
酪胺（styramide，Tyramide）部门在过硫化物酶（HRP）催化反应下被硫化为放任基，该放任基可与核膳食纤维或团体中的酚基、酪氨酸残基共价根据，于是该大分子是“酪胺电磁波放缩（TSA）”的技术的基本化学药品中的一个。在免疫检测荧光、原位改良品种 (ISH)、团体显像可以将电磁波准确度度升级 10–100 倍，并变现高安全性分析高性和低图片背景。二、合并流程概要（科学实验室建设中的安防系统级方法）iFluor 594 Styramide 的镶嵌注意可分成几大有些：荧光纺织染料母核的创建与表达，及酪胺的偶联发生反应。实践出产中或者早已有 iFluor 594 活性酶类酯或间体，故此这为正常化学反应路线规划的简易化方法论。步聚 1：搭建 iFluor 594 纺织染料骨架iFluor 594 应归的改进罗丹明类或半菁（carbopyronine）类颜料。常常从香气胺/苯酚类起点物与酮或酯缩合转为二芳基酚酞内酯组成，再确认官能团加入自动调节网络化学性质，收获消化/火箭发射在 590 nm 以内的颜料。接下来将母核去磺化或加入性侧链，提供水溶解性及抗群聚性。进行 2：传入可偶联的可溶性位点要与酪胺达成安稳键，常伴纺织染料两端机遇羧酸（–COOH）、亲水性酯（如 NHS-ester）、异硫氰酸酯（–NCS）或卤代亲水性位点。惯用的是 NHS 酯，而是它能与伯胺快捷达成酰胺键，且适宜于水/有机的共混标准。最常见的方法：按照氨基与琥铂酸酐作用引进 –COOH；继续使用 EDC/NHS 或 DCC/NHS 活性产生 iFluor 594 NHS-ester。部骤 3：酪胺的的准备酪胺（p-hydroxyphenethylamine）实际上具有刺激性伯胺和酚羟基，另外伯胺为偶联位点，酚羟基为未果与靶标共价整合的特异性位。但是在偶联关键时期需爱护酚羟基防止出现副想法（如实用 TBDMS 或 Bn 爱护）。爱护后留下伯胺以与染色剂想法。步数 4：偶联生理反应（关键的步数）在无水 DMF 或 DMSO 中，将 iFluor 594 NHS-ester 与确保后的酪胺在温柔碱（如 DIPEA 或 TEA）普遍存在下掺和，在常温或略降温 1–4 h。体现转换 iFluor 594–(酰胺)–酪胺之间体。关键步骤 5：脱保障若酚羟基被自我保护好，需要使用酸（如 TFA）、氢解（Pd/C + H2）或氟化物（如 TBAF）快速清理自我保护好基，恢愎活性氧酪胺的结构。操作步骤 6：纯化经常用制作型 HPLC（反相 C18）、蛙胶柱层析或铝离子相互交换柱清掉未化学反应免疫试剂、分太低子杂物。对的敏感活性染料需闭光进行。布骤 7：表现与证明¹H NMR / ¹³C NMR 设计证实MS MALDI/ESI 研究分析碳原子量HPLC 饱和度（>95%）UV-Vis / Fluorescence 光谱分析测试代谢与火箭发射峰pH 保持稳界定量分析、光保持稳界定量分析测试产品名称：iFluor 594 Styramide
色度：95%+相对性状：混合物或药液存放必要条件：-20°C空气干燥背光包存包装设计的规格：50mg 100mg 250mg 500mg（按需作为）产家：pg电子娱乐游戏app 生态学
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