AT 590 Succinimidyl Ester,CAS号:670269-33-7,反应机理
AT 590 Succinimidyl Ester,CAS号:670269-33-7,作用研究进展
AT 590 Succinimidyl Ester(CAS号670269-33-7)是一种功能性荧光标记试剂,由AT 590荧光核心和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活性酯官能团组成。AT 590是一种橙红色荧光染料,激发峰约为590纳米,发射峰约为610纳米,具有高量子产率、亮度高和光稳定性良好的特点。NHS酯末端为分子提供高度选择性的化学活性,可在温和条件下与伯胺(–NH₂)官能团发生共价结合,生成稳定的酰胺键,从而实现蛋白质、多肽、抗体及其他含氨基生物大分子的标记。AT 590 Succinimidyl Ester的结构通常包括荧光核心、活性酯末端以及可能的亲水性取代基,以提高水溶性和在生物体系中的分散性。
反应迟钝生理机制AT 590 Succinimidyl Ester的反馈基本原理一般系统设计NHS酯与伯胺的亲核减伤-转变反馈。在舒适状态下,NHS酯也是种髙度温顺的羧酸衍化物,其酰基碳水分子代有局部正带电粒子,使其易受亲核生化试剂攻。实际上反馈过程中包含一下关键步骤:亲核进攻
伯胺分子中的氮原子具有孤对电子,能够对NHS酯碳原子进行亲核攻击。在反应开始阶段,伯胺的氮原子攻击酰基碳,形成一个四面体反应中间体。此步骤是反应的速控步骤,反应速率受pH和溶剂极性影响。通常在中性或弱碱性缓冲液(pH 7.0–8.5)中进行,以保证伯胺的亲核性最大化,同时维持NHS酯的稳定性。离去基脱离
在四面体中间体形成后,NHS离去基通过重排脱离,生成稳定的酰胺键。NHS离去基为N-羟基琥珀酰亚胺,其离去能力较强,使得反应在温和条件下即可高效完成。该步骤形成了共价键,将AT 590荧光团稳定连接到伯胺所在的生物大分子上。生成稳定酰胺键
反应最终产物是AT 590荧光团与蛋白质、抗体或多肽上的氨基形成的稳定酰胺键。该共价键化学稳定性高,不易水解,能够在生物实验条件下保持荧光信号和标记稳定性。- 作用生活条件的直接影响
- pH值:含碱至弱含碱有弊于伯胺亲核性,互相要保持NHS酯不蛋白质水解反应。过低pH易削减反映传输速度,过高pH机会1蛋白质水解反应。
- 液态物质:水或缓冲区液态物质系有利于,可以治极少量导电性有机会液态物质如DMSO以溶解完疏水中物。
- 温湿度:反响通常情况下在空调温度或常温下实施(4–25华氏摄氏度),温润水平以减少荧光猝灭和生物学原子核组成毁坏。
- 摩尔比:NHS酯大多数略大量以狠抓标注有力;面对敏感度核营养物质,可以操控的制摩尔比以变少找色偶联对机构或的功能的会影响。
英文名称: ATTO 590 NHS ESTER*



pg电子娱乐游戏app
微信公众号
官方微信