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FITC-10-Hydroxydecanoic acid,FITC-10-羟基癸酸的纯化与表征
发布时间:2025-11-19     作者:axc   分享到:
FITC-10-Hydroxydecanoic acid,FITC-10-羟基癸酸的纯化与分析方法

FITC-10-羟基癸酸是一种荧光衍生物,由荧光染料异硫氰酸荧光素(FITC)与 10-羟基癸酸偶联形成。FITC 是一种广泛使用的绿色荧光染料,激发波长约为 495 nm,发射波长约为 520 nm。通过与 10-羟基癸酸的偶联,FITC-10-羟基癸酸将荧光特性引入含羟基的脂肪酸分子,实现荧光标记,同时保留羟基和羧基等功能基团的化学活性。该化合物常用于脂质分子标记、脂肪酸代谢研究及分子成像实验。

框架上,FITC-10-羟基癸酸包涵这三个的部分:FITC 的异硫氰酸基团、对接的羟基癸酸链,并且羧基尾端。异硫氰酸基团会与羟基或氨基反应迟钝造成增强的共价键,使 FITC 与 10-羟基癸酸偶联,以此合成增强的荧光氧分子式。羟基癸酸链可以出具必须的疏水,使氧分子式在脂质环境中可产品定位,同時羟基可以出具全面骤化学工业绘制的已经性。纯化方案FITC-10-羟基癸酸的制成常见可以通过异硫氰酸基团与羟基化学体现参与。在化学体现做完后,结果比调物中有可能含未化学体现的 FITC、未偶联的羟基癸酸及副结果,因须要纯化以有纯净版的标示结果。长用的纯化的方式还包括:
  1. 柱层析
    • 用透明蛙胶或反相透明蛙胶(C18)算作稳固相。
    • 按照正负梯度方向冲洗掉,也可以合理剥离 FITC-10-羟基癸酸与未症状物。
    • 因 FITC-双重性物在太阳光的红外光谱线或可以看到光下极具溶解,可利用太阳光的红外光谱线查重更快的确定终产物。
  2. 极有效率高效液相色谱(HPLC)
    • 反相 HPLC 经常使用于进步纯化,有效确保货物溶解度高与 95%。
    • 洗刷液常见为水-乙腈等度工作体系,需加入一些酸(如乙酸)以改进剥离 特效。
    • HPLC 探测促使用 495 nm 激起光谱监测器 FITC 的释放峰,确保安全总体目标副产物纯净度。
  3. 放置与重沉淀
    • 在其他具体情况下,可利用融化力差异,使用有机溶剂积累或重沉淀出掉未响应物。
    • 如在正负高沸点稀释剂中容解副产物后,加如非正负高沸点稀释剂沉积 FITC-10-羟基癸酸,进两步快速清理游离态 FITC。
表现具体方法纯化后的 FITC-10-羟基癸酸通常情况下可以通过各种定量分析形式完成表现,以核定组成部分和饱和度:
  1. 核磁嗡嗡声(NMR)
    • ^1H NMR 可以用在于根本羟基癸酸链及 FITC 馥郁环的检查是否位移。
    • ^13C NMR 可进一个步骤填写羧基、羟基及香气碳的化学上的环境。
    • NMR 光谱仪能够 分析偶联可否完整,并检测未反應的羟基或 FITC。
  2. 质谱(MS)
    • 使用质谱可刷出原子量内容,安全验证 FITC-10-羟基癸酸的原子質量是否有与认识论值一样的。
    • 适用措施其中包括 ESI-MS 或 MALDI-TOF,可判断原子核亚铁正离子峰及主要是泥石亚铁正离子。
  3. 分光光度计-看得出光光谱图(UV-Vis)
    • FITC 含有有特点吸取峰,在 495 nm 符近有强吸取。
    • UV-Vis 光谱图能否尽快查证荧光基团的的存在及氨水浓度。
  4. 荧光光谱图
    • 激活可见光光的波长 495 nm,旋光度的测定放出可见光光的波长约为 520 nm。
    • 荧光难度常用于风险评估标志利用率及纯化实际效果。
  5. 薄层色谱(TLC)
    • 很简单很快查看有机物的出现和响应是否是完完全全。
    • 可以用在分光光度计灯观察动物 FITC 荧光点,分辩未作用物和产品。

产品名称:FITC-10-羟基癸酸

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FITC-10-羟基癸酸

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