AF633 C5 Maleimide，AF633 C5 马来酰亚胺的不起作用方法流程

AF633 C5 马来酰亚胺结构中含有一个马来酰亚胺官能团和一个 C5 碳链连接臂。马来酰亚胺可选择性地与自由巯基（-SH）反应，例如蛋白质或多肽中的半胱氨酸残基。在略偏碱性条件下（通常 pH 6.5–7.5），巯基以硫负离子形式存在，对马来酰亚胺的 α,β-不饱和酮发起亲核攻击，形成稳定的硫醚键，实现染料与靶分子的共价结合。C5 碳链提供了一定的空间灵活性，使染料结合后不易干扰蛋白质构象或活性位点。

主要的化学反应步数方式：

1. 水溶液预备：将 AF633 C5 马来酰亚胺存量液分解于常温、干燥 DMSO 或 DMF 中，基本上浓度值为 1–5 mM，背光保存图片。存量液应杜绝含水分，防患未然蛋白质水解形成特异性调低。
2. 核核蛋白酶质或多肽准备好：待标识的核核蛋白酶或多肽融掉在响应液中，响应液应因为没有含巯基干拢物（如 DTT、β-巯基甲醇等），经常用到 PBS、Hepes 或碳酸盐响应液，pH 保持在 6.5–7.5。核核蛋白酶溶度应该在 1–10 mg/mL。
3. 表现交织：将储备量液掺水至适宜工作中氨水浓度，与淀粉酶稀硫酸按磨尔比下载，通用摩尔比区间为 1:1 至 5:1（颜料:淀粉酶）。交织后轻柔弄反或选转混匀，不要巨烈自激振荡以限制淀粉酶性变。
4. 发应迟钝前提：在室内温度或 4℃ 下阴凉孵育 30–120 半个小时。发应迟钝期限据蛋白质巯数量量和发应迟钝转化率优化，确保刻意积极主动标出而不过渡装饰。
5. 解除表现：表现结尾后，可经由成为低浓硫酸浓度巯基有机物（如 L-半胱氨酸或谷胱甘肽）或随便参与纯化来解除未表现的纺织染料。
6. 化合物纯化：通常用策略以及透析、抑菌凝胶吸附（如 Sephadex G-25）或离心法滤器剔除存在染色剂。纯化后可换取维持、均一的 AF633 标示蛋白酶或多肽。

AF633 C5 马来酰亚胺符号后的血清在光纤激光切割机的上表現为远红荧光，激起光谱约 630 nm，发射点光谱约 650–670 nm，远红光区性能指标降低了肿瘤细胞自体荧光扰乱，适用多入口通道荧光显像。是由于马来酰亚胺对巯基角度进行性，符号反响会相关性扰乱血清的任何功用基团。C5 碳链的长度适当，可极大减少荧光染色剂与血清外层或活力位点的就直接遇到，进而控制血清构象增强。使用的时应当特别注意下例项目：以免 阳光直接照射，储备库液应地温生活环境阴凉导出，操作的中以免 含巯基修复剂和高浓盐生活环境。标志后的终产物承当快于测量或地温生活环境导出，以保证荧光硬度和微菌物吸附性。AF633 C5 马来酰亚胺可多方面应于蛋白酶标志、免疫受损细胞测量、受损细胞三维激光散斑和微菌物分子结构搜寻等测量，为多色荧光三维激光散斑作为固定、可以控制的远红荧光数据。物商品编码称：AF633 C5 马来酰亚胺色度：95%+特性：胶体或液存储必要条件：-20°C缺水阴凉保存文档包装箱年纪：50mg  100mg  250mg  500mg（按需具备）制造商：pg电子娱乐游戏app 生物学

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