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​AF488-TSA,Alexa Fluor 488酪胺,反应原理
发布时间:2025-11-26     作者:axc   分享到:

AF488-TSA,Alexa Fluor 488酪胺,反应原理

AF488-TSA 属于酪胺信号放大(Tyramide Signal Amplification, TSA)系统的荧光底物。其核心结构由 Alexa Fluor 488 荧光团与酪胺分子通过化学键连接而成。酪胺可以在过氧化物酶(如 HRP, horseradish peroxidase)催化下形成高度活泼的自由基,能够与附近的芳香族氨基酸残基共价结合,实现靶分子的荧光标记。

不起作用原理图主要是收录左右几条布骤:
  1. 酪胺钝化:在具有过钝化氢(H₂O₂)和 HRP 的前提下,AF488-TSA 中的酪胺氨基被钝化,形成了短寿命的自在基。该期间中 HRP 催化钝化 H₂O₂ 将酪胺底物钝化为活力性自在基,生理反应快速快且极高局域化。
  2. 只有基共价搭配:出现的酪胺只有基极具过强的亲网络性,可与靶球蛋白或随近团队中的幽香族碳水化合物残基(如酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸)产生共价键。这样的搭配是不能可逆性的,使荧光团粘紧地粘接在靶原子核随近。
  3. 荧光走势强化:犹豫有一个 HRP 氧分子式就能够崔化各个酪胺底物组成人权基,因为在靶蛋白酶符近会沉淀积累大批量 AF488 荧光氧分子式,构建走势调小。与直接的标记图片抗原相信,TSA 整体就能够相关性上升低丰度靶商标检查迅敏度,还持续面积判定率。
  4. 环境空间局域性:基于随意基人类适用期限短,不起作用其主要产生在 HRP 附近小区,活性染料的沉积物层面局域化。这衡量了数据增强学习不会轻易扩散转移到非靶空间区域,因而缩短蓝本躁声。
  5. 荧光特点:AF488 抑制光吸光度约为 495 nm,反射光吸光度约为 519 nm,反射在绿光区,光不安全性处理性强、色度高,非常适合与别的荧光活性染料联手完成多色激光散斑。
AF488-TSA 的用资源优势是低丰度靶标有高敏锐加测。凭借与一抗或二抗偶联的 HRP 通过,AF488-TSA 在催化反应传到靶团伙火车站附近沉淀多荧光团伙,实现了荧光手机信号的明显调大。鉴于记号图片是共价通过,记号图片后的荧光团伙在紧接着的洗衣和显像的过程 中坚持不稳,不适合掉发。便用时应要注重:发生发应管理体制中应控住 H₂O₂ 含量和发生发应周期,以应对非炎症因子聊天堆积或阻止软组织损伤。发生发应环节中应背光工作,提高荧光淬灭。试验结束后可完成一般封片或显像,提升高信噪比的荧光数据。

产品名称:AF488-TSA 

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