CAS号:2182601-71-2,Cy5-DBCO,Cy5-二环己烯炔荧光偶联试剂的制备方法
CAS号:2182601-71-2,Cy5-DBCO,Cy5-二环己烯炔荧光偶联制剂的制备方法
Cy5-DBCO 中文名称为“Cy5-二环己烯炔荧光偶联试剂”,其中 Cy5 表示远红荧光染料(激发波长约 650 nm,发射波长约 670 nm),具有高光稳定性和亮度;DBCO 为二环炔结构,可与叠氮官能团分子发生铜自由“点击”反应,实现高效率、特异性的标记。该试剂通常为活性衍生物,用于构建荧光标记蛋白、寡核苷酸或其他生物大分子。
化学组成与特性
Cy5-DBCO 由两部分组成:
- 荧光纺织染剂部份(Cy5):Cy5 应属氰基偶氮纺织染剂(Cyanine dye),其共轭框架体现远红荧光优点,包括较高的量子劳动生产率和光比较稳界定,可在多色荧光激光散斑中看做远红工作区标上。
- 影响官能团(DBCO):DBCO 就是一种环弹性较高的二环炔,可能与叠氮基团更快的形成环减伤影响(SPAAC),影响不可铜促使剂,禁止铜亚铁离子对生物制品团伙(如蛋清质或肿瘤细胞)的未知致癌性。Cy5-DBCO 实现比较稳判定的酰胺或碳链与染剂相邻,具有物理化学比较稳判定性和影响活性酶类。
制备方法
Cy5-DBCO 通常通过化学偶联的方法制备,可分为以下步骤:
- 原材料筹备
- Cy5-NHS 酯或 Cy5-亲水性羧酸具象化物
- DBCO-胺(DBCO-NH₂)
- 晾干充分稀释剂(如 DMSO 或 DMF)
- 缓冲器区安全体系:可以使用吹干的碳酸盐缓冲器区液或三乙胺(TEA)做为强碱的环境以力促酰胺键出现
- 偶联不良反应
- 将 Cy5-NHS 酯溶解完于低温干燥石油醚中,加如 DBCO-NH₂ 的摩尔吃太多,使氨基与 NHS 酯产生亲核暴伤,提取 Cy5-DBCO 的酰胺键。
- 体现管理体系应阴凉,并在在常温或稍低一些温下缓缓的搅拌器,体现时段常见为数每小时至住宿,以确保安全生产高导出率。
- 作用监测
- 反應的过程 中可按照薄层色谱(TLC)或科学规范色谱仪色谱(HPLC)监控录像偶联乙酰乙酸型成及未反應底物的消耗掉。
- 可可以通过荧光的检测确保 Cy5 荧光卫星信号会有,并首次理解标上转化率。
- 生成物纯化
- 的反馈开始和结束后,用矽胶柱层析或反相效率液质色谱(RP-HPLC)分离出来 Cy5-DBCO 化合物,避开分散 Cy5 或未的反馈 DBCO。
- 纯化后的货物平常冻干同步永久保存或熔化分解于潮湿 DMSO 中永久永久保存,遮光、常温同步永久保存以提升荧光几丁质酶。
- 特点验正
- 纯化后的 Cy5-DBCO 可作于3d模型叠氮化物分子结构的 SPAAC 反映校验。
- 可用质谱、HPLC 或荧光光谱分析判断格局恰当性、饱和度及荧光优点。
产品名称:Cy5-DBCO
溶解度:95%+相对性状:固态物体或液态物质贮存情况:-20°C非常干燥背光保存文档包装机产品规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提拱)批发厂家:pg电子娱乐游戏app 生物技术


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