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FITC-Phalloidin的实验操作要点
发布时间:2025-11-27     作者:wyh   分享到:
厂商品分类称:FITC-Phalloidin的实验工作工作步骤1. 组成与关键技术Phalloidin:始于毒白蘑菇Amanita phalloides的环状七肽毒性,以高判断力(Kd≈20 nM)选取性紧密结合在一起丝状肌动球球蛋白(F-actin),不紧密结合在一起单个肌动球球蛋白(G-actin),可固定微丝组成部分并可以抑制其解聚。FITC:荧光记号物,充分调动可见光波长495-496 nm,放出绿色环保荧光(513-516 nm),适应荧光显微镜的FITC路通道。混合物优点:分子结构量约1177.3 Da,水无水磷酸氢,内径约12-15 Å,对F-actin的活性朋友通过无树木物种不同,可采用于动树木及微细小微生物组织细胞。2. 怪物学采用关键功用:符号体癌人体细胞核骨架中的F-actin,用在探究体癌人体细胞核姿态、动态图變化(如伪足导致、体癌人体细胞核移迁)、体癌人体细胞核裂开及组织化结构的。测试消费场景:加固不变上皮细胞/集体切成片(需室内甲醛或戊二醛加固不变,防止出现甲醇损毁肌动蛋清)。神经元养育物、无神经元安全体系(如纯化的肌动球蛋白纤维素)。多色荧光影像(常与DAPI、TRITC等联用,标记图片細胞核或其余格局)。定量探讨探讨:确认荧光抗弯强度评定F-actin分子量,测试口服药物/遗传基因对组织骨架的影晌。3. 實驗操作使用基本知识永久保存与标定:冻干粉或DMSO/甲醇溶剂样式,-20℃遮光存为(很好的期约一年)。运行液溶液浓度常见为80-200 nM,要用含1% BSA的PBS摇匀以以减少非特喜欢的人根据。刺绣具体步骤(主要方案):神经元比较固定不变(4%多聚室内甲醛,温度10-1两多分钟),预防甲醇比较固定不变剂。透化解决(0.5% Triton X-100,两分种)。FITC-Phalloidin孵育(空调温度阴凉30半个小时,可SEO优化质量浓度与时长)。洗條(PBS清洁工作3次),封片(抗荧光淬灭剂+DAPI复染受损细胞结构)。特别留意特别注意:Phalloidin无毒(LD₅₀≈2 mg/kg),操作的需戴橡胶手套、穿检测服。解决确定剂含甲醇,制止肌动球蛋白格局受损。岗位液现配在用,防止出现复发冻融。

FITC-Phalloidin

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