CY5-Protein-A，CY5标上的核蛋白A的现象基理

Cy5-Protein A 是一种通过荧光染料 Cy5 与蛋白A（Protein A）共价修饰形成的标记蛋白。Protein A 是金黄色葡萄球菌分泌的蛋白，能够高亲和力结合免疫球蛋白的 Fc 区域，因此在免疫学实验中常用于抗体纯化、免疫检测和分析。Cy5 是红色荧光染料，激发光波长约650 nm，发射光约670 nm，具有高荧光强度和稳定性。Cy5-Protein A 的形成使 Protein A 具备可视化功能，可用于免疫检测、细胞成像及结合实验。

化学式构成本质特征Cy5-Protein A 由2个分成小组成：

1. Protein A：蛋白酶质骨架有效多种多样不良反应性氨基、半胱氨酸等官能团，可以作为为共价遮盖位点。Protein A 的 Fc 运用实际特质未受广度催化遮盖引响，可控制其运用实际特质。
2. Cy5 荧光颜料：Cy5 大多数以 NHS 酯方法存有，可以与球蛋白的氨基组成固定的酰胺键。Cy5 给予橙红色荧光走势，也可以于同时观察植物 Protein A 的地理分布、构建程序及免疫系统复合材料物组成。

不起作用生理机制Cy5-Protein A 的共价标识主要是忽略于氨基的亲核反馈机制化：

1. NHS 酯产甲烷：Cy5 荧光颜料后部完成 N-hydroxysuccinimide（NHS）构成产甲烷酯，网上缺点使其对亲核免疫试剂比较敏感，比较是胆固醇质赖氨酸残基上的氨基。
2. 亲核作战：Protein A 上的氨基在酸碱性缓解经济条件下体现为未质子化的亲核行驶，可作战 Cy5-NHS 酯的羰基碳，建立在期间过度态。
3. 酰胺键达成：经过了质子转到和离去基团挥发释放，NHS 被置換，氨基与羰基达成相对稳定的酰胺键，进行 Cy5 与 Protein A 的共价相结合。
4. 控制呈现状态：进行设定 Cy5-NHS 与 Protein A 的摩尔比、不起作用准确时间和 pH，可以控制 制标示导热系数，保障球蛋白组合亲水性和荧光数据信号权衡。

试验能力典型的现象在 pH 7.5–8.5 的缓解液中实施（如 PBS），和气的环境温度水平下搅匀数个钟头，以减少淀粉酶质性质发生变化或 Cy5 光安全可靠稳定性分析降。现象已完成后，借助透析、反渗透膜或凝胶的作用滤水的还原未现象的 Cy5，实行纯化记号结果。

产品名称：Cy5-Protein A

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