Alexa Fluor555-NHS，AF555-活性酯的人工流程简析

Alexa Fluor 555-NHS（简称AF555-NHS）是一种水溶性荧光染料的活性衍生物，属于Alexa Fluor染料系列。其吸收波长约为555 nm，发射波长约为565–570 nm，具有稳定的荧光信号和较高的量子产率。AF555-NHS特别设计用于与含游离氨基的生物分子（如蛋白质、肽和多肽）发生共价偶联，从而实现荧光标记和可视化分析。AF555-NHS通过其NHS酯官能团提供高度反应性，使染料能够在温和条件下与目标分子形成稳定的酰胺键。

构成特质AF555-NHS的分子设备构造设备构造可可分成几个部件：荧光基本、化学性质掩盖基团和NHS渗透性酯官能团。

1. 荧光核心
   荧光核心通常为共轭芳香族或苯并呋喃环体系，提供稳定的共轭电子系统，实现高量子产率和耐光性。共轭体系的设计保证染料在紫外-可见光区域具有特定吸收峰和发射峰，使其适用于光学显微镜、流式细胞术和荧光成像等实验。

2. 极性修饰基团
   为提高水溶性，AF555分子通常在核心结构上引入亲水性侧链或离子性基团，如磺酸盐、羟基或羧基。这些修饰基团不仅增强染料在水溶液中的分散性，还减少聚集和非特异性吸附，提高生物实验中标记的可靠性。

3. NHS活性酯官能团
   分子末端的NHS（N-羟基琥珀酰亚胺）酯为活性位点，可与生物分子上的游离氨基发生亲核取代反应，形成稳定的酰胺键。NHS酯具有较高反应性，在弱碱性条件（pH 7.2–8.5）下能迅速发生反应，同时避免水解导致的产物损失。

提炼工作简述AF555-NHS的提炼基本上分成几个大部分环节：荧光价值体系打造、实用功能化装饰和产甲烷NHS酯化。

1. 荧光核心构建
   荧光核心通常通过多步有机合成获得，包括芳香族环的偶氮化、环化及取代反应。该步骤的关键是建立稳定的共轭体系，保证最终染料具有所需的吸收和发射特性。合成过程中需要控制温度、溶剂体系和pH，以实现高收率和结构选择性。

2. 极性修饰
   在荧光核心形成后，通过引入磺酸盐、羧基或其他亲水性官能团实现水溶性增强。这些修饰通常通过醚化、酯化或烷基化反应完成，确保染料在水溶液中稳定分散，同时不会显著影响光学性能。

3. NHS活化
   在羧基官能团上引入NHS酯，将羧基活化为易于与氨基偶联的形式。该步骤通常使用DCC（N,N’-二环己基碳二亚胺）或EDC（1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺）作为脱水试剂，将羧基转化为NHS酯。反应需在干燥溶剂和避光条件下进行，以防止水解和荧光损失。

机构填写与表现转化成成功的AF555-NHS经常利用多类概述有效途径对其进行表现，包含：质谱（MS）查验氧分子量，核磁共震（NMR）验收格局全版性，红外光谱仪图-见到吸收的作用光谱仪图和荧光光谱仪图旋光度的测定光学材料类型。利用这个表现的方式就可以确保安全生产NHS酯亲水性、荧光密度及水无水磷酸氢实现险遭怪物偶联进行实验的规定。

产品名称：Alexa Fluor 555-NHS

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