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AF647-LPC,AF647标记溶血磷脂酰胆碱的反应原理
发布时间:2025-12-02     作者:axc   分享到:
AF647-LPC,AF647标出溶血磷脂酰胆碱的响应原则

AF647-LPC是一种荧光标记的磷脂分子,由水溶性荧光染料Alexa Fluor 647(AF647)与溶血磷脂酰胆碱(Lysophosphatidylcholine, LPC)通过共价偶联形成。AF647具有吸收峰约为650 nm、发射峰约668 nm的特性,荧光信号强、光稳定性高且水溶性良好。通过将AF647标记在LPC分子上,可以实现磷脂在细胞膜、脂质体或纳米颗粒体系中的可视化追踪,为生物膜研究、药物递送体系和脂质代谢分析提供实验工具。

LPC的有机化学性质LPC是溶血型磷脂,原子节构由甘油骨架、单一个碳水化合物酸链和磷酸胆碱头基分解成。磷酸胆碱地方打造正负极官能团,甘油骨架和碳水化合物酸链打造疏水溶性,使LPC呈两亲性原子。原子上富含徘徊羟基、羧基及磷酸酯基,为荧光颜料的共价偶联打造未知反应迟钝位点。标示具体步骤中,都要使用性地将荧光颜料进行连接到LPC的正负极头基或羟基端,恢复疏水顶部节构,为了避免损害原子的两亲性功能及膜植入力量。反馈基本原理AF647-LPC的偶联一般根据AF647的抗逆性延伸物主要形式,如NHS酯(N-hydroxysuccinimide ester),能够化学上还原反映将荧光染色剂特定在LPC原子上。还原反映的基本原理是可以内容梗概为下例好多个进行:
  1. 羟基或氨基活化
    LPC分子上的极性官能团(如游离羟基或经修饰引入的氨基)可与AF647-NHS酯发生反应。在反应开始前,NHS酯通过水溶液或有机溶剂溶解,形成反应活性物种,为与LPC分子上的亲核中心结合做好准备。

  2. 亲核取代反应
    AF647-NHS酯的酯基对亲核攻击高度敏感。LPC分子上的羟基或氨基作为亲核试剂,攻击NHS酯的碳原子,形成稳定的酯键或酰胺键,同时释放NHS分子。这一共价键将AF647牢固连接到LPC分子头基,保证荧光信号在水溶液体系中稳定。

  3. 温和反应条件
    偶联反应通常在弱碱性或中性缓冲液中进行,室温或轻微加温以保持LPC两亲性结构及荧光染料活性。反应条件温和可减少脂肪酸链氧化或磷酸酯水解,保证标记后分子仍具备生物膜嵌入能力。

  4. 反应终止与纯化
    反应完成后,可加入甘氨酸或Tris缓冲液终止残余NHS酯反应。随后通过透析、凝胶过滤或薄层色谱等方法去除未反应的染料和副产物,得到高纯度的AF647-LPC。纯化后产物保持两亲性结构及荧光性能,可直接用于膜体系或脂质体研究。

反馈特性
  • 进行高:NHS酯对羟基或氨基想法非特异聊天强,偶联其主要会出现在磷脂头基,不影向肌肉酸尾巴格局。
  • 稳定符号相对密度:采用调节AF647与LPC的摩尔比,是可以管理荧光符号次数,坚持大分子两亲性及膜添加的特点。
  • 安全稳界定:造成的酯键或酰胺键在水盐溶液体系建设中安全相对稳定,事关荧光数据信号经常性可以使用。
  • 兼容性设置强:图标后的AF647-LPC可在脂质体、纳米技术小粒、癌细胞模拟机管理体制中若匀乳状液,实现膜效果和分子式习惯。

产品名称:AF647-LPC

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AF647-LPC

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