CY3-PEP-1，花菁染料CY3标记穿膜肽PEP-1的物理与化学特性
CY3-PEP-1，花菁染料CY3标记穿膜肽PEP-1的物理学与生物学性状
CY3-PEP-1 是将 Cyanine 3（Cy3）荧光染料 与 穿膜肽 PEP-1 共价结合形成的标记分子。Cy3 是一种广泛使用的可见光荧光染料，具有良好的光学性能和适当的水溶性。PEP-1 是一种典型的穿膜肽，含有带正电荷的氨基酸序列，可在细胞膜上实现快速渗透和内化。通过 Cy3 对 PEP-1 进行荧光标记，可在体外或体内实验中追踪肽分子在细胞或组织中的分布和转运。
化学结构与特性
CY3-PEP-1 的分子结构由两部分组成：
- Cy3 有机染料骨架：由三个吡咯环用亚甲基链衔接养成增加共轭工作体系，给分子式式因而光区的融合（约 550 nm）和射出（约 570 nm）程度。标志分子式式呈橙大红色荧光，可在荧光显微镜或光谱仪仪下检查测量。
- PEP-1 肽链：PEP-1 一般而言含有正正电荷蛋白质残基，可与 Cy3 的特异性基团（如 NHS 酯或异氰酸酯）转变成稳固的酰胺键。标识后的 CY3-PEP-1 保持肽的穿膜优点，与此同时含有荧光可检则性。
- 表面：橙粉红色粉丝或固体颗粒，溶于于水、PBS 或旋光性可挥发液体（如 DMSO）。
- 电子光学本质特征：降解峰约 550 nm，释放峰约 570 nm，释放光为橙红。
- 安全平稳性分析：变干條件下相比较安全可靠，但在水硫酸铜溶液中 N-羟基酯标记符号那部分可能性发生了电离，但是存贮需温度低阴凉。
- 反應性：Cy3 的生物酯基与 PEP-1 氨基反應产生酰胺键，标记图片高效率根据于 pH、容剂及摄氏度。
- 原材的准备
- PEP-1 肽碎末（含氧化钙含量 N-端氨基或赖氨酸残基）
- Cy3-NHS（灵活性酯的方式）
- 正负无水容剂（如 DMSO 或 DMF）
- 弱强碱抗震液（如 0.1 M 碳酸盐抗震液，pH 8.3）
- 催化氧化剂：需加入微量分析三乙胺（TEA）
- 肽析出与不起作用準備
- 将 PEP-1 溶水于弱碱性食物响应液中，维持 pH 在 8–9，保证 氨基有力滋养。
- Cy3-NHS 首先需要溶解度于 DMSO 或 DMF 中，减少所需的水分引致特异性酯电离。
- 标上生理反应
- 慢慢地加进 Cy3 盐氢氧化钠溶液至肽盐氢氧化钠溶液中，还慢慢搅拌装置均匀的。
- 症状常在空调温度或稍低一些温（20–25°C）下通过 4–12 小的时候，闭光操控以才能减少荧光损耗。
- 可选择肽与 Cy3 摩尔比调正记号成度，使用肽：有机染料比值 1:1.2–1.5。
- 副产物纯化
- 反應成功完成后，可能够 更高效高效液相色谱（HPLC）、透析或凝露过滤水取除未反應的游离子 Cy3。
- 自身纯化后的 CY3-PEP-1，并在高湿背光的条件下干躁或冻干永久保存（-20°C）。
- 物质测量
- 太阳光的紫外线-由此可见光谱仪光谱仪（UV-Vis）核定 Cy3 溶解峰约 550 nm
- 荧光光谱分析检则导弹峰约 570 nm
- 可进行质谱（MS）或孔隙管电泳确认肽原子与 Cy3 的共价综合
应用特点
CY3-PEP-1 将荧光信号与穿膜肽功能结合，可用于多种实验场景：
- 受损内部浸入探析：经由荧光显宏观察 CY3-PEP-1 在受损内部内地域分布和摄食动力机学
- 蛋清质或核酸递送：需用为穿膜承载搜寻氧分子货物运输
- 成相检测：结合实际共自动对焦光学显微镜做按量或市场定位研究
- 原子示踪与化学发光法进行分析：荧光比强度可于半化学发光法或化学发光法肽的获取及内化
产品名称：CY3-PEP-1
含量：95%+相对性状：粉状或液滴存储环境：-20°C晾干背光存放打包尺寸规格：50mg 100mg 250mg 500mg（按需供应）生产商：pg电子娱乐游戏app 菌物
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