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CY3-SS-31,花菁染料CY3标记靶向肽的纯化过程
发布时间:2025-12-05     作者:axc   分享到:

CY3-SS-31,花菁染料CY3标记靶向肽的纯化过程中

CY3-SS-31 是由 Cyanine 3(Cy3)荧光染料 与 SS-31 靶向肽 共价结合形成的标记分子。Cy3 是一种可见光荧光染料,具有吸收峰约 550 nm、发射峰约 570 nm 的橙红色荧光,可在荧光显微镜、流式细胞术及光谱分析中使用。SS-31 是一种短肽,由特定氨基酸序列组成,具有线粒体靶向特性,可用于细胞内药物递送、分子示踪和靶向治疗研究。通过 Cy3 标记,SS-31 获得可视化荧光信号,使其在体外或体内实验中可直接追踪,便于分析肽的分布、摄取及定位行为。

物理型式与性能特点CY3-SS-31 氧分子由两个部分组名成:
  1. Cy3 荧光纺织染料骨架
    • Cy3 由的两个吡咯环使用亚甲基链演变成增长共轭制度,使氧分子在屏蔽光区更具挥发和反射特性。
    • 可溶性基团(如 N-羟基蜜腊酰亚酯 NHS 或 maleimide)可与肽大分子上的赖氨酸 ε-氨基或半胱氨酸巯基造成共价连结。
    • 荧光成分比较稳定,可在高倍显微镜及光谱概述概述中一定量监测。
  2. SS-31 肽骨架
    • SS-31 为短肽,一般富含半胱氨酸和赖氨酸残基,胺基酸编码序列经由改善以实行线粒体靶向疗法。
    • 标志常的选择对肽靶向疗法系统决定世界最大的酪氨酸位点,如 N-端氨基或者是非关键的赖氨酸。
    • 标签后的 CY3-SS-31 继承肽原本的的靶向药物作用及生物工程活性酶。
制成过程中慨述CY3-SS-31 的镶嵌通常保持肽与 Cy3 吸附性随之出现物的共价发生反应保持,主要步凑正确:
  1. 肽水溶液预备
    • 将 SS-31 肽冻干粉充分均匀溶解于加载区液(如 PBS、碳酸加载区液)或潮湿有机质石油醚(如 DMSO),有机废气浓度基本为 1–5 mM。
    • 溶剂 pH 掌控在碱或弱碱(pH 7–9),增强氨基或巯基的亲核性,催进标示生理反应。
  2. Cy3 灵活性并衍生物盐溶液制取
    • Cy3-NHS 或 Cy3-maleimide 需充分均匀溶解于烘干的充分石油醚(DMSO、DMF),禁止湿气从而导致活力性基团水解反应。
  3. 化学反应混合着
    • 将肽盐溶液与 Cy3 化学活化随之出现物按相当摩尔比混合式(平常 Cy3 略量过大)。
    • 恒温或轻柔调温(20–37°C)反馈 4–12 个小时,阴凉搅伴以护理荧光性能方面。
  4. 发应解除与开始处理
    • 反應已完成后,可让用透析、疑胶滤出或固相浓缩剔除未反應的 Cy3。
    • 开始清理可减小副生成物和轻松自由有机染料对试验的打扰。
纯化过程中
  1. 极有效率液质色谱(HPLC)
    • 反相 HPLC 最常用于纯化 CY3-SS-31。
    • 采用了反相 C18 柱,梯度方向管理体制为水-乙腈,的检测可见光波长必选择 550 nm 荧光或 214 nm UV紫外线挥发。
    • 征集梦想峰后冻干,获取高色度 CY3-SS-31。
  2. 终产物定量分析
    • UV-Vis 光谱仪:消化吸收峰约 550 nm,询问 Cy3 核心思想型式详细完整。
    • 荧光光谱分析:火箭发射峰约 570 nm,效验荧光网络信号承载力。
    • 质谱(MS)或 HPLC:查证标记图片错误率及原子核量变化。
    • SDS-PAGE 荧光扫描仪扫描:可直观教学检查测量荧光图标肽原子核。
研究注意力细节
  • CY3-SS-31 易光增白,应遮光低温制冷的效果另存(4°C 预期,-20°C 继续)。
  • 标记符号现象应把控好 pH 和有机溶剂场景,以防肽挥发或染剂电离。
  • 纯化后化合物可冻干补充,能保证荧光电磁波安全和靶向疗法工作详尽。

产品名称:CY3-SS-31 

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CY3-SS-31

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