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CY3-TP-7,Selanc,花菁染料CY3标记抗焦虑特性七肽的反应步骤
发布时间:2025-12-05     作者:axc   分享到:
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CY3-TP-7(Selanc)是由 Cyanine 3(Cy3)荧光染料与 TP-7 七肽共价标记形成的分子。TP-7 七肽,也称为 Selanc,是一种短链肽,由七个氨基酸组成,。通过 Cy3 标记,TP-7 获得可检测的荧光信号,使其在体外或体内实验中可进行可视化追踪、分布分析及靶向研究。CY3-TP-7 分子由两部分组成:Cy3 荧光骨架与 TP-7 七肽骨架。Cy3 由两个吡咯环通过亚甲基链形成延长的共轭 π 系统,使其在可见光区具有吸收和发射能力,吸收峰约 550 nm,发射峰约 570 nm,可用于荧光显微镜、流式细胞术及光谱分析。TP-7 七肽含有可用于标记的 N-端氨基或赖氨酸残基,标记过程中应选择不影响肽功能的位点,以保持其生物活性。CY3-TP-7 的反应步骤主要包括溶解肽、溶解染料、标记反应、反应终止及纯化。首先,将 TP-7 七肽溶解于缓冲液或适宜的有机溶剂中,浓度通常在 1–5 mM,并调节 pH 至 7–9,以确保氨基或巯基的亲核性。Cy3-NHS 或 Cy3-maleimide 活性衍生物需溶解于干燥的有机溶剂如 DMSO 或 DMF,避免水分导致活性基团水解。随后将肽溶液与 Cy3 活性衍生物按照适当摩尔比混合,通常染料略过量,以确保充分标记。反应在室温或轻微加温条件下(20–37°C)进行,避光搅拌 4–12 小时,使 Cy3 与肽端形成稳定酰胺或硫醚键。反应完成后,可使用透析、凝胶过滤或固相萃取去除未反应的染料及副产物,保证标记产物纯度。进一步通过反相高效液相色谱(HPLC)分离纯化,采用 C18 反相柱,梯度体系为水-乙腈,检测波长可选 550 nm 荧光或 214 nm 紫外吸收。收集目标峰后冻干,即得到高纯度 CY3-TP-7。纯化后的产物可通过 UV-Vis 光谱、荧光光谱及质谱(MS)进行表征,确认 Cy3 核心结构完整、标记效率及分子量变化,同时保持 TP-7 的功能性结构。CY3-TP-7 在水溶液中溶解良好,荧光信号可用于定量分析和细胞摄取研究。在实验操作中,应避光低温保存(4°C 短期,-20°C 长期),使用缓冲体系进行稀释,避免高温或极端 pH 导致肽降解或荧光衰减。通过 CY3 标记,TP-7 的分布、摄取及靶向行为可在体内或体外实验中进行可视化追踪,便于研究其神经调节机制及药物递送性能。CY3-TP-7 兼具荧光可视化能力与七肽生物活性,反应步骤清晰、操作可控,为抗焦虑肽的示踪、递送及功能研究提供可靠实验工具,同时保留分子结构稳定性和生物学功能。

产品名称:CY3-TP-7(Selanc)

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