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CY3-Transferrins,CY3标记转铁蛋白的反应原理
发布时间:2025-12-05     作者:axc   分享到:

CY3-Transferrins,CY3记号转铁蛋白酶的发应目的

CY3-Transferrins 是由 Cyanine 3(Cy3)荧光染料与转铁蛋白(Transferrin, Tf)共价结合形成的标记分子。Cy3 是一种可见光荧光染料,具有吸收峰约 550 nm、发射峰约 570 nm 的橙红色荧光,可在荧光显微镜、流式细胞术及光谱分析中用于分子示踪和定量检测。转铁蛋白是一种约 80 kDa 的糖蛋白,主要功能是结合和运输铁离子,在细胞膜上通过转铁蛋白受体(TfR)介导铁摄取。通过 Cy3 标记,转铁蛋白获得可检测的荧光信号,使其在体外或体内实验中可进行分布追踪、细胞摄取分析及靶向研究。CY3-Transferrins 分子由两部分组成:Cy3 荧光骨架与转铁蛋白蛋白骨架。Cy3 由两个吡咯环通过共轭亚甲基链形成延长的 π 共轭体系,使其在可见光区具有吸收和发射能力,活性基团如 N-羟基琥珀酰亚酯(NHS 酯)可与转铁蛋白赖氨酸残基的 ε-氨基形成稳定酰胺键,实现共价标记,同时保持蛋白的结构和受体结合功能。CY3-Transferrins 的反应原理主要依赖于 NHS 酯与蛋白氨基的亲核取代反应。在反应过程中,Cy3-NHS 在缓冲体系中与转铁蛋白中的赖氨酸残基发生亲核攻击,生成稳定的酰胺键,完成荧光标记。该反应通常在 pH 7–9 的缓冲液中进行,以提高氨基的亲核性并保持蛋白活性,同时避光以防荧光漂白。标记过程中,Cy3 与转铁蛋白的摩尔比需适当控制,通常染料略过量以保证标记效率,但避免过度标记导致蛋白构象改变或受体结合能力下降。标记反应完成后,可通过透析、凝胶过滤或固相萃取去除未反应的 Cy3,并进一步使用反相高效液相色谱(HPLC)或凝胶过滤柱进行纯化,以获得高纯度的 CY3-Transferrins。纯化后的产物可通过 UV-Vis 光谱、荧光光谱及质谱(MS)进行表征,确认荧光染料的结合及标记效率,同时保证蛋白的功能性结构完整。CY3-Transferrins 在水溶液中溶解良好,荧光信号稳定,可用于体外细胞摄取实验及体内分布追踪。在实验操作中,应避光低温储存(4°C 短期,-20°C 长期),使用缓冲体系进行稀释,避免高温或极端 pH 导致蛋白降解或荧光衰减。通过 CY3 标记,转铁蛋白与其受体的结合、摄取和运输过程可在荧光显微镜或流式细胞术中直接观察,为铁代谢研究、靶向药物递送及蛋白分布分析提供可视化工具。CY3-Transferrins 兼具荧光可视化能力和转铁蛋白的受体结合功能,反应原理清晰、操作简便,为蛋白示踪、靶向研究及药物递送提供可靠的实验基础,同时保持分子结构稳定性和生物学功能。

产品名称:CY3-Transferrins

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CY3-Transferrins

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