链霉亲和素-AF680偶联物，Streptavidin, AF680 Conjugate，APP于分子式标示

链霉亲和素-AF680偶联物（Streptavidin, AF680 Conjugate）是一种将链霉亲和素（Streptavidin）与荧光染料AF680（Alexa Fluor 680）通过化学偶联反应结合形成的复合物。AF680是一种近红外荧光染料，具有较长的激发波长（约680 nm）和发射波长（约700 nm），非常适合用于多重标记、深部组织成像、小动物体内成像等生物医学领域。链霉亲和素-AF680复合物利用了链霉亲和素与生物素之间的强亲和力和AF680染料的荧光特性，广泛应用于分子标记、流式细胞术、免疫检测、荧光成像等实验。

分解部骤制作而成链霉亲和素-AF680偶联物的的过程例如将链霉亲和素与AF680荧光颜料进行有机化学反應偶联在同时。下例是普遍的制作而成步。1. 链霉亲和素的打算

• **链霉亲和素（Streptavidin）**是Streptomyces avidinii菌株中提练的四聚体核蛋白，兼备极富的与怪物工程素综合的效率。链霉亲和素的氧原子量至少为60 kDa，每项氧原子够与另一个怪物工程素氧原子特喜欢的人综合。在生成已经，链霉亲和素一般来说情况下需在酌情的缓冲器区液中（如PBS或HEPES缓冲器区液）开始溶解完，并调结至为宜的硫酸铜溶液浓度（一般来说情况下为1-10 mg/mL）。应特别注意能保证链霉亲和素硫酸铜溶液的pH值在7.4范围。
• 2. AF680荧光颜料的需备与活性

AF680染剂般以NHS（N-Hydroxysuccinimide）酯组织形式提供了，中有活性酶酯基团，这会让它都可以与链霉亲和素上的氨基基团（如赖氨酸残基上的氨基）的反应，组成共价键。于是，第一方面须要将AF680染剂化学降解在符合的有机溶剂中（如DMSO或水），一般来说化学降解有机废气浓度为1-5 mg/mL。立刻，AF680染剂液体须要在雪上手机截图，解决染剂化学降解。小心：AF680纺织染剂的NHS酯基团是敏感性，由此溶解出来后的纺织染剂水溶液应再次代替偶联现象，避免出现长耗时展现在光学习环境或持续高温学习环境中。3. 偶联现象的实行此为操作步骤中，链霉亲和素与AF680活性染色剂的反响将在4°C的高湿下对其进行，以减轻反响传输率，抓实反响的选取性和有效性。应当，将AF680活性染色剂倒入到链霉亲和素硫酸铜溶液中，抓实二者之间的摩尔比适量，一般是为1:1或略有过度的活性染色剂（举个例子1.5倍量）。AF680活性染色剂中的NHS酯基团与链霉亲和素外表的氨基（如赖氨酸的氨基）进行亲核反响，进行增强的共价键。发应耗时平常为1-2小。此步骤中，链霉亲和素的每个碳原子会与某个或各个AF680有机染色剂碳原子运用，而使增強黏结物的荧光警报。发应步骤中保持着在超高温下，以防止出现链霉亲和素的变形和有机染色剂的溶解。4. 去掉未反应迟钝的活性染料反應完结后，未反應的AF680染色剂和小原子核杂物必须要 借助透析或凝露过虑避开。常见的的方式是运行透析袋（如原子核量割孔为10-30 kDa的透析袋）将偶联反應系统与未反應的染色剂分离，透析时候常见必须要 持续时间几个钟头，也许有一天氢氧化钠溶液中已经具有游走的染色剂。别的种方式是运行凝露过虑柱（如Sephadex G-25），借助冲洗掉进行避开过多的未反應染色剂。为确保安全弄掉其它杂物，就可以在UV紫外线-可看见光谱图图（UV-Vis）或荧光光谱图图研究分析液体，以验证颜料的纯净度和偶联物的荧光功能。

名称：链霉亲和素-AF680偶联物

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