Fluorescein-PEG-NHS，荧光素-聚乙二醇-N-羟基蜜腊酰亚胺酯的制备方法

Fluorescein-PEG-NHS 的中文名称可译为荧光素-聚乙二醇-N-羟基琥珀酰亚胺酯，其中 Fluorescein 表示分子一端连接了荧光素（fluorescein），可发出绿色荧光信号，用于生物分子标记和检测，PEG 表示分子中间为聚乙二醇链段，提供柔性、水溶性和空间缓冲，使分子在水溶体系中均匀分散并减少非特异性吸附，NHS 表示末端羧基通过 N-羟基琥珀酰亚胺活化形成的活性酯，能够与含氨基的分子发生高选择性反应，生成稳定的酰胺键，实现偶联和功能化。Fluorescein-PEG-NHS 的制备方法通常包括 PEG 选择与修饰、荧光素偶联和末端活化三步。首先，选择合适分子量的线性或支链 PEG，保证水溶性和柔性，并对一端羧基或羟基进行保护或直接用于荧光素偶联。其次，将荧光素通过其活性异硫氰酸酯或羧基形式与 PEG 的氨基或羟基偶联，通常在有机溶剂或缓冲体系中进行，控制反应温度和时间，以确保荧光团有效连接且保持荧光性质。偶联过程中，可采用轻度碱性条件（如 pH 7.5–8.5）或有机溶剂体系，通过亲核取代反应形成稳定的共价键，同时避免荧光素光敏性导致降解。第三步为末端活化，将 PEG-荧光素偶联产物的羧基通过 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）进行活化，生成 Fluorescein-PEG-NHS。该反应通常使用活化剂如 DCC 或 EDC，在有机溶剂或干燥体系中进行，确保羧基完全转化为 NHS 酯，同时避免水分导致水解。活化完成后，产物可通过柱层析、透析或冷冻干燥进行纯化，以获得水溶性良好、荧光稳定、NHS 酯活性可控的 Fluorescein-PEG-NHS。制备过程中需要注意控制反应温度、溶液 pH 及干燥环境，以保持 PEG 链的柔性和荧光团的光稳定性，同时防止 NHS 酯水解影响偶联效率。整体而言，Fluorescein-PEG-NHS 的制备方法通过 PEG 选择与修饰、荧光素偶联及末端 NHS 活化三步实现，其分子结构兼具荧光标记功能、PEG 链柔性和水溶性以及末端高选择性活性，能够在蛋白质修饰、纳米载体功能化、荧光追踪及多分子偶联体系构建中发挥重要作用，为生物化学、药物递送及材料科学研究提供可靠的分子基础和实验工具。

产品名称：Fluorescein-PEG-NHS

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