CAL Fluor Red 610 dT Amidite，CAL Fluor 橘红色 610 标记符号脱氧胸苷亚磷酰胺化物

CAL Fluor Red 610 dT Amidite 的中文名称通常为CAL Fluor 红色 610 标记脱氧胸苷亚磷酰胺化物，简称CAL Fluor Red 610-dT 亚磷酰胺。其中，dT 表示脱氧胸苷（deoxythymidine），是 DNA 核苷酸中的胸腺嘧啶单元；CAL Fluor Red 610 是红色荧光染料，激发波长约为 590 nm，发射波长约为 610 nm；Amidite 表示其含有活性磷酰胺基团，可用于固相 DNA 合成，将荧光染料功能化整合到寡核苷酸链的 5’-末端或内部位置。该修饰单体广泛应用于荧光探针、分子检测和核酸功能化研究。

二、配制方式方法

1. 染料与核苷酸前体的偶联
   CAL Fluor Red 610 通过羧酸活化或酰胺化方法与脱氧胸苷的 5’-羟基连接。首先，将 CAL Fluor Red 610 染料活化为 NHS 酯或其他可亲核进攻的活性中间体，然后与保护了 3’-羟基的脱氧胸苷（dT）在有机溶剂（如 DMF、DMSO）中反应，生成荧光标记核苷酸。

2. 磷酰胺化处理
   偶联完成的荧光标记 dT 经纯化后，将 3’-羟基保护、5’-羟基连接磷酰胺基团（P(III)），生成对应的 dT Amidite。磷酰胺化通常使用含有 2-氰乙基（CE）的氯化磷酰胺或二异丙基氨基磷酰胺试剂，在干燥、无水条件下进行，以避免水解，提高产率和稳定性。

3. 保护基选择与操作条件
   在制备过程中，5’-端通常保护有 DMT（Dimethoxytrityl，二甲氧基三苯甲基）保护基，以保证在固相 DNA 合成中磷酰胺偶联的选择性。CE 保护基保护磷酰胺中心，避免在溶液中被水分解。整个制备过程需在避光、无水条件下进行，以防荧光染料降解或磷酰胺水解。

4. 纯化与鉴定
   完成磷酰胺化反应后，通过反相高效液相色谱（HPLC）进行纯化，去除未反应染料、杂质和副产物。纯化后的产物通常通过质谱（MS）和核磁共振（NMR）等方法确认结构与纯度，确保适用于固相 DNA 合成。

5. 最终产品储存
   CAL Fluor Red 610 dT Amidite 通常以干燥固体或溶液形式储存于低温、避光条件下，以保持化学稳定性和荧光活性。

三、总结
CAL Fluor Red 610 dT Amidite（CAL Fluor 红色 610 标记脱氧胸苷亚磷酰胺化物）是一种功能化核苷酸单体，通过将红色荧光染料与脱氧胸苷偶联，再进行磷酰胺化处理制备而成。其制备方法包括染料偶联、磷酰胺化、保护基控制、纯化鉴定和低温避光储存。该修饰单体可用于荧光探针、实时 PCR、FISH 及核酸功能化研究，为分子生物学实验提供高灵敏度和稳定性的红色荧光标记工具。

产品名称：CAL Fluor Red 610 dT Amidite 

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