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H2DCFDA (DCFH-DA) | 一种可渗透细胞的用于检测细胞内活性氧 (ROS) 的探针 使用说明书(包含活性氧检测原理和步骤)
发布时间:2021-11-11     作者:zhn   分享到:


H2DCFDA (DCFH-DA) 是一个种可加入组织的,广泛用于检测工具组织内化学活化氧 (ROS) 的电极 (Ex/Em=488/525 nm)H2DCFDA (DCFH-DA) 别称有以下的叫法:

DCFH-DA 活力性氧ROS荧光电极

英文音标英文名字称:2′,7′-Dichlorofluorescin diacetate

DCFH-DA,羟基自由度基检测器,cas4091-99-0

催化活性氧荧光测试探针(DCFH-DA)

H2DCFDA(DCFH-DA)

2',7'-二氯荧光素二乙酸酯

2,7-二氯二氢荧光素二乙酸酯

2′,7′-Dichlorodihydrofluorescein Diacetate

DCFH-DA 特异性氧ROS荧光电极

2',7'-DICHLOROFLUORESCIN DIACETATE, FOR FLUORESCENCE

2-(2,7-Dichloro-3,6-diacetoxy-9H-xanthen-9-yl)benzoic acid

DCFH-DA, ROS 电极

神经细胞内抗逆性氧在线检测测试探针DCFH-DA

H2DCFDA(DCFH-DA)是一种种通用性的空气氧化应激性信号灯剂

H2DCFDA (DCFH-DA) 活性酶氧(ROS)荧光测试探针

DCFH-DA充分调动光波波长

DCFH-DA大分子量

DCFH-DA抗逆性氧判断目的和步奏

抗逆性氧荧光测试探针(DCFH-DA),H2DCFDA,ROS荧光测试探针

2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯,2,7-Dichlorodihydrofluorescein diacetate,4091-99-0


DCFH-DA实用介绍书:

本品以粉丝形态带来,可立即易溶无水DMSO配制成1-10mM储存液,常用工作浓度1-10μM,需根据自身的实验体系或参考文献进行优化。
主要性能指标:
CAS NO:4091-99-0
团伙式:C24H16Cl2O7
碳原子量:487.29
饱和度:≥97%
铜网外观:粉色-带土黄色亮泽的粉色粉未
融解性:易溶于DMSO(25mg/ml)、DMF(25mg/ml)、无水乙醇(25mg/ml)
构造式:
H2DCFDA (DCFH-DA)

保护:-20oC避光干燥保存,-少2年。

需要注意细节:
1.有机的石油醚如DMSO储放液需分开包装成单笔剂量后,-20oC背光保持,防止出现反复性冻融。
2.从而您的和健康的,请穿实验设计服并戴多次性皮手套操作步骤。

运行技术:
有以下步聚是来源地于一大批文章个人总结的简单的的操作工作流程,仅作对比。观众需按照不同的利用和铭非理性来做改变。
1.将高湿包存的冻干粉拿掉回-环境温度,低速行驶离心力使纳米银溶液掉落在瓶底。随后加进少量无水DMSO或许多无机高沸点溶剂配成成1-10mM处理液。未用完的DMSO处理液需灌装并遮光冻有-20℃,禁止频繁冻融。
2.于正式的调查前,用生物学盐缓存液(好比:PBS,HBSS,HEPES)摇匀到事业含量1-10μM。需结合关键APP来变动合适的的事业含量。
3.吸引培养教育液,入驻步驟2)专门配制的染色的任务液到组织细胞内,温度或30℃孵育5~60min。
4.抽走染色法办公液,用暖机的女性生活减慢液或神经元提升液拆洗一边。继续参与暖机的女性生活减慢液或神经元提升液,在合适热度内孵育。面对二乙酸酯发展物,须要匆忙还原时候让神经元内酯酶将其溶解,导致让有机染料对氧化作用应激作用诞生作用。佳的还原时候规模很广,在任何神经元型一般性凸显**低级别的酯酶活力。
5.将神经元裸露于进行实验的刺激物刚刚,先分析刷新神经元的环境荧光屈服强度。
6.结合下面现状开展弱阳差表(Negative control),
①浅绿色发射卫星光谱图内体检未复染细胞膜的自荧光情形。
②针对于免疫印迹分享,确定颜料初始化和除理后受损细胞膜的前向角散射和侧向角散射是变。受损细胞膜图片尺寸的影响或许与起泡或收缩关与,由除理或有害物反馈出现的。
③对是指和不是指的刺激物的活性染料和缓冲液/培育基的无神经元搅拌物完成荧光检查测量。在包含神经元外酯酶和许多阳极脱色物酶的事情下,伴随着时期荧光的日渐增长机会与一瞬间水解反应、气流阳极脱色物、和/或光引导阳极脱色物相关。
④查验培育在种植培育液或简简单单响应液内的未治理初始化人体组织血血生殖受损细胞系(参考)的荧光。在键康人体组织血血生殖受损细胞系内,人体组织血血生殖受损细胞系内酶和/或抗阳极空气被氧化剂会去除此类氧政治权利基。由有机颜料初始化复合时段后,键康人体组织血血生殖受损细胞系很有可能突出表现出低情况的荧光数字信号,且在某个调查前三天对于相对稳定。显然,渐渐加入(主要是因为自阳极空气被氧化)或影响(主要是因为人体组织血血生殖受损细胞系内有机颜料剥夺或光淬灭)也会有很有可能洞察分析到。在没有所有的促使物或成脂剂的机制内,键康和未治理人体组织血血生殖受损细胞系突发找到强荧光,揭示人体组织血血生殖受损细胞系的发生消亡或点其他的的阳极空气被氧化惨案。
7.建造弱阳對照,可能性加以正中间法的刺激脱色特异性:
①促使剂(PMA,运作氧浓度100pM~10μM)
② H2O2或TBHP(终氧化还原电位~100μM)(会根据血细胞自己对其的敏锐度和现象性来增加或调低氧化还原电位)
8.确保激励**或类有机物都不会轻易因起活性颜料荧光淬灭。排查类有机物的溶解光谱仪分析,来确定类有机物的溶解峰都不会轻易与空气氧化后活性颜料的大增强或使用光谱仪分析發生交叠。

 H2DCFDA (DCFH-DA)

郑州pg电子娱乐游戏app 微生物提高一方面分荧光电极

在太阳光的紫外线-看不见-近红外区有症状荧光,而且其 荧光特征(提高和射出光的波长、 挠度、耐用度、 偏振等)可于所在区域生态环境的特征,如正负、光折射率、粘性等变了而流畅地变了的类荧光性分子式。

会发光电极:

CAS

命名

用途

4091-99-0

DCFH-DA

羟基优质基探头

104821-25-2

DHE, 二氢乙锭

超防金属氧化物阴阴阳离子测试探针

121714-22-5

Fluo 3-AM

钙荧光探头

162558-52-3

MQAE

氯阴阳离子荧光检测器

Thermo的E34250

ER-Tracker Red

内质网红主播色荧光检测器

34215-57-1

DiO

生殖细胞核生态荧光测试探针

127274-91-3

DiD

神经细胞核远红外荧光测试探针

254109-22-3

DAF-FM DA

NO荧光检测器

大家zhn2021.11.11