FITC荧光标记的原理是什么？具体操作步骤如下：

　　(一)原理

　　近几年用做抵抗技能阳性阳性记号的荧光素主要的有异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocynate，FITC)或罗达明(Lissamine rhodamine B200，RB200)。在性条件下FITC的碳酰胺键可与抵抗技能阳性阳性赖氨酸的E氨基共价结合在一起起来，记号后的抵抗技能阳性阳性仍维持与相对应抗原结合在一起起来的技能。在荧光灯源太阳光的太阳辐射线或兰紫光抑制下带来黄精彩纷呈荧光，凭借在荧光显微镜下关察或流式细胞核术细胞核仪深入分析可对相对应抗原实施明确、位置或酶联免疫法的论文检测。

　　(二)操作步骤

　　将纯化的IgG抗原对PH9~9.5碳酸盐缓冲区液透析留宿，透析后抗原液移入小烧杯杯称取合适量FITC，倒入二甲亚硕(DMSO)(FITC-1mg/1ml DMSO)使终溶液氧浓度为1mgFITC/1mlDMSO FITC/IgG占比：如IgG溶液氧浓度为1mg/ml，FITC/IgG占比约为50ugFITC/mgIgG;　　如IgG为5~10mg/m1，则比率为25μgFITC/mlIgG 在10ml小烧小杯先放抗原　　按综上所述比例图将FITC-DMSO氢氧化钠饱和溶液逐滴入入透析后的抗原氢氧化钠饱和溶液会标注物用PBS加至2.5m1，磁链接混合器室内温度下闭光混合2h。　　用PD10柱(SephadexG25柱)删去氧化钙含量荧光素，先用25m1PBS淋洗G25柱整理PBS过柱**个荧光素融入蛋清峰，旋光度的测定F/P相对分子质量，**个荧光素峰为氧化钙含量荧光素。

　　换算得：适当的F/P参考值2~4。

　　(三)试剂器材

　　1.纯化的多克隆抗原阳性或单克隆抗原阳性。　　2.FITC(Fluorescein-5-Lsothiocyanalte)或沒有荧光色素沉着。　　3.PBS、DMSO 4.PH9~9.5碳酸盐缓解液：Na:CO34.3g,NaHCO38.6g加蒸溜水至500ml。　　5.PD10柱(SephadexG25柱)　　6.磁性拌和器，紫外线分光光度计等

　　(四)注意事项

　　1.FITC维持于4℃D暗处，动用前待制剂瓶上升室内温度时开盖称取，以解决潮解。　　2.FITC-DMS0液要临用时调配。　　3.碳酸盐降低液要最新鲜专门配制。

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产品名称	规格
FITC-Avidin	1mg(2.5mg/ml)
FITC-HA MW:500K	100mg
壳寡糖-FITC	100mg
FITC-Dextran MW:20K	10mg
Concanavalin A-FITC	5mg(1mg/ml)
FITC-Dextran MW:500K	100mg
FITC-Dextran MW:100K	50mg
PPS50K-PEG4K-FITC	100mg
FITC-Dextran MW:5K	50mg
FITC-Dextran MW:40K	10mg
SH-PEG1K-FITC	100mg
FITC-Dextran MW:100K	10mg
FITC-壳寡糖-油酸	10mg