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抗凝血因子VIII单克隆抗体杂交瘤细胞株的制备方法
发布时间:2020-10-15     作者:axc   分享到:

经由用牛血清正血清BSA人与人血凝功能分子VIII偶联后的偶联物做为抗原免疫系统Balb/c小鼠,取其脾脏人体内部与SP2/0骨髓瘤人体内部做人体内部相融,用HAT培育基做会目的性培育,用比较有限溶解稀释法经由反复克隆化,经由建立赢得稳固产出抗人血凝功能分子VIII单克隆抵抗能力的有性杂交瘤人体内部株。

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化学合成方法步骤:1)分离纯化抗体抗原:依据同型双系统蛋清热塑剂将人血凝因素VIII与 牛血纯洁蛋清偶联,获得人血凝因素VIII-牛血纯洁蛋清偶联物;2)天然免疫抗体系统小鼠:选用小服用量长时间天然免疫抗体系统措施,用工作步骤1)中拥有的人 血凝细胞VIII-牛血纯洁蛋白质偶联物帮助天然免疫抗体系统抗原,对Balb/c小鼠实行免 疫;3)组织生殖内部整合:将SP2/0小鼠骨髓瘤组织生殖内部与通过2)刷快的免疫内部Balb/c 小鼠的脾脏组织生殖内部整合,在有效HAT的RPMI-1640培养出基中通过决定性培 养;4)有性有性杂交瘤生殖神经細胞的选泽性提升出:在方法流程3)中融为一体后的生殖神经細胞在HAT提升出基 任选泽性提升出后,选泽小鼠脾脏生殖神经細胞与小鼠有性有性杂交瘤生殖神经細胞SP2/0的融为一体生殖神经細胞;5)单克隆化:将方法4)中取得的经判断为呈阳性的有性杂交瘤神经元经局限做好稀释工作法做好频繁单克隆取得稳定性高分泌出抗人血凝細胞因子VIII单克隆抗原的杂 交瘤神经元株。