中文翻译明称：EHA101体验态神经元   标准：0.1ml*10支   种类：生物化学生化试剂。（用做科研工作检验科研）   另存：-80℃   什么是基因型   C58(rifR)TipEHA101(pTiBo542DT-DNA)(kanR,strepR)Nopaline   產品反映   EHA101菌株为C58型图片背景，核遗传表观遗传中有效筛分标鉴——利福平抗性遗传表观遗传rif，考虑到适用于应用进行操作使用，此菌株带入一无自己集运职能的胭脂碱型Ti质粒pEHA101(pTiBo542DT-DNA)，此质粒有效vir遗传表观遗传(vir遗传表观遗传是T-DNA放植被遗传表观遗传组须得的元器件，pEHA101(pTiBo542DT-DNA)质粒自己的T-DNA迁移职能被毁损，但就可以帮到改变的双元各种载体T-DNA顺利的迁移)。pEHA101(pTiBo542DT-DNA)型Ti质粒有效筛分标鉴：strep、kan，拥有EHA101菌株链霉素抗性和卡那霉素抗性，应适用于玉米棒、小麦、烟草行业等植被的转遗传表观遗传进行操作使用，经pK7WGF2质粒在线检测应用质量可达到104cfu/μgDNA。   操作流程方案   1.取-80℃存放的农杆菌极其态于温度或手脚稍作待其地方融解，所处冰水相溶模式时导入冰中。   2.每100μl大量态加1μg（质量不于10μl）质粒DNA，手摸致电管底混匀，由小到大于雪上静置4分种、液氮4分种、37℃水浴4分种、冰浴4分种。   3.加如700μl无抗菌素的LB或YEB液體塑造基，于28℃，200rpm振荡器塑造2~3小。   4.6000rpm离心力很多钟收菌，留取100μl以内上清悄悄的吹打重悬菌块涂布纸于含合理消炎药的LB或YEB小米平板电脑上，错位放于28℃教育培养出来箱教育培养出来2-3天。 要留意法定程序

1. 加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10；质粒不纯或存在乙醇等有机物污染，转化效率急剧下降；质粒增大一倍，转化效率下降一个数量级。
2. 2. 混入质粒时应轻柔操作，转化高浓度的质粒可相应减少**用于涂板的菌量。
3. 利福平浓度不应高于25 μg/ml，过高的利福平浓度不利于农杆菌生长，会降低其生长速度和转化效率。本公司感受态计算转化效率时所用平板只含有50 μg/ml kan，若所用平板同时含有20 μg/ml rif则转化效率降低到1/2。
4. 培养基中加入利福平的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌；根据所用菌株抗性加入链霉素或庆大霉素可防止Ti质粒丢失，但链霉素不利于农杆菌的转基因操作，所以一般培养农杆菌时不考虑链霉素或庆大霉素，Ti质粒丢失的概率** (可以忽略)。

1、农杆菌相关内容四环素秘方：

抗菌素	方法	原液溶度	上班氧浓度
羧苄青霉素 (carb)	双蒸水溶解完，0.22 μm滤膜过滤器除菌	50 mg/ml	50 μg/ml
硫酸钠卡那霉素 (kan)	双蒸水融掉，0.22 μm滤膜过滤水除菌	50 mg/ml	50 μg/ml
链霉素 (strep)	双蒸水溶水，0.22 μm滤膜油烟净化器除菌	10 mg/ml	50 μg/ml
利福平 (rif)	DMSO分解，0.22 μm滤膜油烟净化器除菌	10 mg/ml	20 μg/ml
庆大霉素 (gent)	双蒸水降解，0.22 μm滤膜过滤系统除菌	20 mg/ml	40 μg/ml

2、最常见农杆菌抗性： (R：抗；S：神经敏感。)

农杆菌菌株	羧苄青霉素(carb)	链霉素(strep)	利福平(rif)	庆大霉素(gent)	磷酸卡那霉素(kan)
AGL-1	R	R	R	S	S
EHA101	S	R	R	S	R
EHA105	S	R	R	S	S
LBA4404	S	R	R	S	S
GV3101	S	R	R	R	S

  3、LB及YEB配方内容：

component	LB(液态物质)/L	LB(固状)/L	component	YEB(固体)/L	YEB(固态物体)/L
Tryptone	10 g	10 g	Tryptone	5 g	5 g
Yeast extract	5 g	5 g	Yeast extract	1 g	1 g
NaCl	10 g	10 g	羊肉浸膏	5 g	5 g
NaOH	调PH到7.0	调PH到7.0	绵白糖	5 g	5 g
Agar	－	15 g	MgSO4*7H2O	0.49 g	0.49 g
			NaOH	调PH到7.0	调PH到7.0
			Agar	－	15 g