DiR标记内脏脂肪来源外泌体

一、染料概述

DiR是一个种近红外脂无水磷酸氢荧光有机有机染料，是指碳氢链掩盖的Cyanine类有机有机染料，发挥主吸光度约为748 nm，发送主吸光度约为780 nm，实使用机体外激光散斑。在其宽度亲脂性，能植入外泌体膜，实使用关注外泌体的区域划分和集运。

二、标记原理

五脏六腑乳酸源头外泌体（Visceral Adipose Tissue-derived Exosomes）有经典的脂质双层玻璃膜，DiR能够疏水相护功用插进脂膜，达成增强的荧光标记图片架构，不会影响外泌体职能或架构。

三、实验步骤

1. 外泌体提取：收集脂肪组织来源培养上清，离心法或超滤法富集外泌体；
2. DiR染料溶液制备：使用DMSO溶解DiR后稀释入PBS，控制终浓度一般为1 μM；
3. 标记反应：与外泌体在37℃孵育15–30分钟；
4. 去除游离染料：超速离心或使用Exosome Spin Columns分离；
5. 验证标记效率：通过激光共聚焦、IVIS系统或流式细胞术观察荧光强度。

四、应用价值

体內跟踪设计：采用小鼠脾脏、肺、肾等脏器靶点设计； 评议组织开展摄入事情：洞察分析内脏组织碳水化合物来源于外泌体在靶人体系统的聚集程度； 分解理论探讨：与高血压、分解网络综症、胰岛素抵*等关联关系新机制理论探讨。

五、注意事项

用到前进行过滤颜料，制止水解； 操控有机染料溶液浓度，尽量避免自集中荧光要素； 摆放于阴凉4℃，中长期间实用。