DiR标记内脏脂肪来源外泌体

一、染料概述

DiR是一个种近红外脂可溶荧光染剂，应属于碳氢链体现的Cyanine类染剂，激起光的光波长约为748 nm，释放出光的光波长约为780 nm，适合于身体内部外影像。随着其高宽比亲脂本质，能放入外泌体膜，适合于跟踪外泌体的遍布和集运。

二、标记原理

肾脏皮脂渠道外泌体（Visceral Adipose Tissue-derived Exosomes）具备着其最典型的的脂质双层玻璃膜，DiR确认疏水主动使用插入图脂膜，形成了平衡的荧光标上组成，不不良影响外泌体职能或组成。

三、实验步骤

1. 外泌体提取：收集脂肪组织来源培养上清，离心法或超滤法富集外泌体；
2. DiR染料溶液制备：使用DMSO溶解DiR后稀释入PBS，控制终浓度一般为1 μM；
3. 标记反应：与外泌体在37℃孵育15–30分钟；
4. 去除游离染料：超速离心或使用Exosome Spin Columns分离；
5. 验证标记效率：通过激光共聚焦、IVIS系统或流式细胞术观察荧光强度。

四、应用价值

休内追综深入分析：用在小鼠内脏、肺、肾等感觉器官靶向药物深入分析； 好评团体摄入情况发生：观测脏器人体脂肪主要来源外泌体在靶人体系统的生物富集能力素质； 分解探索：与过胖、分解綜合征、胰岛素抵*等关连体制探索。

五、注意事项

采用前过滤装置有机染料，以防发展； 管控活性染料溶液浓度，不要自涌入荧光干挠； 贮存于遮光4℃，中长期前动用。