肌肉聚集巨噬神经细胞來源的外泌体miRNA可在体内和体外调节胰岛素敏感性

监定巨噬細胞可不可以排泄miRNA:
(1)小室实验设计
使用介绍信外泌体从供体血组织缓解压力后,能实现肾上腺素感觉血组织,且外泌体或是它人体内的产品均能被肾上腺素感觉血组织吸纳。将Cy3标记图片miR-233 mimic的转染进骨髓源性巨噬神经细胞(BMDMS),然后呢养育于Transwell的上室,下室并不是表述Cy3元素的3T3-L1脂肪多细胞系。共锻炼12h后,在下室中探究得粉红色荧光的Cy3-miR-233,是共养育前的6倍,表示这几种人体细胞间普遍存在是一种材质起了运输管理miRNA的功用(图1)。在相较比较实验性中,我们公司用Cy3单个(不与miR-223组合)治理 BMDMs,在与以下BMDM共锻炼12一小时后,出现这一种荧光有机染料在BMDMs中的冒出可轻视不算,在3T3-L1脂肪含量组织细胞中未颜料出现了(图2)。这样,相信巨噬人体血细胞可不可以分沁人体血细胞外miRNA,想一想被摄入到脂质生殖细胞中。

监定ATM能否分泌外泌体:
只为询问肌肉策划 巨噬肿瘤细胞(ATM)是否可以外泌体,从肥胖野生型小鼠的内脏脂肪组织(VAT)中分离出脂肪组织巨噬细胞(ATM)(CD11b+F4/80+),并培养72小时,电子显微镜(图4)和纳米观察分析(图5)显示,通过超速离心分离的颗粒含有丰富的ATM分泌的胞外小泡,其直径为30-100 nm。这些EV的密度梯度超速离心分析证实,它们主要由Exos组成,通过外体特异性蛋白标记物TSG101、syntenin1、CD63等的表达得到证明,主要以图6表示。

图3. 限速抽滤分开外泌体

图4.电镜观察外泌体**杯状囊膜结构

图5.NTA分析外泌体的粒径和浓度表征

图6.Westernblot鉴定TSG101等外泌体蛋白标志物
成品供应信息:胞外囊泡/细胞微粒/微囊泡/外泌体/EVs/exosomes
41860种蛋白质、2838种microRNA、3408种mRNA
外泌体中含RAB4, RAB5和 RAB11,RAB7 和 RAB9
热休克蛋白家族((HSP60, HSP70, HSPA5, CCT2 和HSP90
这些设备仅使用在科研项目,不易使用在我们身体校正!wyf 01.11

pg电子娱乐游戏app
微信公众号
官方微信