荧光素(Luciferin)是最常见菌物性会发光基因遗传荧光素酶(Luciferase)用机制是荧光素酶在Mg2+和O2陆续参与下离子液体荧光素硫化成oxyluciferin,在荧光素的硫化时候中,发表生物技术荧光(bioluminomescence),第三顺利通过化学物质放光仪或液闪判断仪判断微生物荧光。
有分为三类企业产品主要形式,D-荧光素(分散酸),D-荧光素钠盐,及及D-荧光素钾盐。这这几种的产品注意的本质区别就是水解特征参数上:
D-荧光素(游走酸)水可溶甚至保护指标体系的熔化分解性都很弱,除非你不溶弱碱如NaOH和KOH水溶液。
混溶甲醇(10mg/ml)和DMSO(50mg/ml)。
外在:淡黑色膏状
凝固点:200-204℃
放置:-20℃低温制冷的效果闭光存放
结构式

施用方式:
1 离体微生物会发光查测1)1g的D-Luciferin Firefly, free acid可溶性高,溶于水的性入33.3ml的没有细菌水里面的,配好的凉茶成30mg/ml的永久包存文档液(200×)。混匀后用0.2µm滤膜滤水,并且实时利用或全自动灌装机于-80℃阴凉包存文档,防止出现冻融,冻存的永久包存文档液可包存文档在一年。注:D-Luciferin Firefly, free acid永久包存文档液也该用弱碱(如 NaOH,KOH水悬浊液)或DMSO可溶性高,溶于水的性,用强碱pH水悬浊液去可溶性高,溶于水的性本品,要是有沉淀出的發生则必须 調整pH越高直齐全可溶性高,溶于水的性。往后行如何用弱酸性水悬浊液来结合,調整要求的pH环境。
2)用仍然训练基将存放液按 1:200直接稀释就可以(存放液:仍然训练基1:200),配比成工作任务液(终溶度150µg/ml)。
3) 激光散斑前,除去培Luciferase把你想表达出来内部中的培养出基,参加1×荧光素工做液37℃孵育5min, 之后做出图面定量分析。
4)岗位液应在用到后遗弃。
2 体里活体三维成像论文检测
1)1g的D-Luciferin Firefly, free acid用66.6ml的DPBS(, w/o Mg2+ 和Ca2+)自制 D-荧光素业务液(15mg/ml),0.2µm 滤膜过滤装置除菌。混匀后完毕应用或预包装于-80℃阴凉始终维持,避开出现冻融。可能应用,放置 4℃化冻,始终维持冰凉且阴凉,冻存的补充液可始终维持1年时间内。注:D-Luciferin Firefly, free acid补充液也用于弱碱或DMSO(w/o Mg2+)标准配置。
2) 每只耗子的注塑量衡量于耗子的脂肪率:150mg/Kg。
3) 注射液体入身体里 10-15min后,对其进行显像分折。注:意见和建议对每只爬行动物绘图都必须 创建荧光素酶动力系统学弧线,得以敲定网络讯号论文检测准确时间和网络讯号网上平台期。

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