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叶酸靶向修饰纳米红细胞膜包裹阿霉素FA/PEG-DOX-Nano-RBCs(纳米药物递释系统)

发布时间：2021-01-29 作者：axc 分享到：

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本研究采用低渗裂解法及纳米挤出工艺，制备了叶酸和聚乙二醇共同修饰的纳米红细胞膜药物载体，并以此负载盐酸阿霉素构建了一种具有长循环和药物靶向双重作用的新型纳米**递释系统（FA/PEG-DOX-Nano-RBCs）。该载药系统利用了红细胞膜的生物相容性， PEG 长循环作用及叶酸配体的**识别靶向特性，有望提高阿霉素的抗**药效，降低其毒副作用，

FA/PEG-DOX-Nano-RBCs的制取流量图图甲1提示,其重要进行操作步骤以下的:

（1）压积红細胞的分离出

大鼠眼框动脉丛取全血,4000 rpm离心法分离10min弃去血浆和白组织人体细胞层，倒入4倍量预冷的 PBS饱和溶液充分地吹打，4000rpm离心法分离10min弃上清，兼具复下列作业3次，能够得到压积红组织人体细胞。

（2）血影红内部（ghost）的配制

取1mL 压积红神经细胞膜，参加4倍密度低渗0.25×PBS 水溶剂4 ℃孵育20 min （5 min 上下两边变换一次性），6000rpm 离心分离10min，弃上清，再参加4倍密度低渗PBS水溶剂总是的清洗到上清没有颜色，制备血影红神经细胞膜。

叶酸片配体呈现阶段分离纯化

取相等球体积PBS制成的FA-PEG-DSPE 以 mPEG-DSPE悬浊液参加上述内容制成的血影神经元中，于37℃摇床周边孵育1h，4000rpm离心式5min我们要除分散FA-PEG-DSPE及mPEG-DSPE，制成叶酸片及PEG绘制后的血影红神经元。

（4）FA/PEG-DOX-RBCs的光催化原理

取1mL经孕妇叶酸突显的血影血小板膜，填加4倍占地一些溶度的DOX（易溶0.25×PBS）硫酸铜稀硫酸， 4℃状态下振摇孵育30min，填加计算占地的10×PBS精浓液，高温振摇孵育90min。 6000rpm 离心分离10 min，弃上清，用 PBS 硫酸铜稀硫酸洗涤剂两次，做好弃去解离 DOX，填加 4 倍占地PBS硫酸铜稀硫酸，混匀，获取 FA/PEG-DOX-RBCs混悬液。

(5)FA/PEG-DOX-Nano-RBC的制备

取综上所述制得的 FA/PEG-DOX-RBCs 混悬液 5 mL，用量用 20%工作效率红外探头多普勒彩超5min，第二步应用脂质挤压法使其分别依据 800 nm、 400 nm、 200 nm、 100 nm 孔的直径的聚碳酸酯膜 21 次，得到 FA/PEG-DOX-Nano-RBC 混悬液。将FA/PEG-DOX-Nano-RBC 混悬液居于 5 mL 反渗透膜离心法式法管路， 6000 rpm离心法式法 10 min，甩去游离态 DOX，将反渗透膜离心法式法后取得的 FA/PEG-DOX-Nano-RBC 全新悬停于 PBS溶剂中， 4 ℃背光店铺于冰箱冷藏中备品。