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叶酸靶向修饰纳米红细胞膜包裹阿霉素FA/PEG-DOX-Nano-RBCs(纳米药物递释系统)

发布时间：2021-01-29 作者：axc 分享到：

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本研究采用低渗裂解法及纳米挤出工艺，制备了叶酸和聚乙二醇共同修饰的纳米红细胞膜药物载体，并以此负载盐酸阿霉素构建了一种具有长循环和药物靶向双重作用的新型纳米**递释系统（FA/PEG-DOX-Nano-RBCs）。该载药系统利用了红细胞膜的生物相容性， PEG 长循环作用及叶酸配体的**识别靶向特性，有望提高阿霉素的抗**药效，降低其毒副作用，

FA/PEG-DOX-Nano-RBCs的分离纯化方法图就像文中1随时,其准确运作过程中下述:

（1）压积红人体细胞的取出

大鼠眼窝血管丛取全血,4000 rpm抽滤10min弃去血浆和白组织层，倒入4倍比热容预冷的 PBS悬浊液加以吹打，4000rpm抽滤10min弃上清，兼具复据此基本操作3次，能够压积红组织。

（2）血影红内部（ghost）的备制

取1mL 压积红癌神经细胞，填加4倍容积低渗0.25×PBS 氢氧化钠氢氧化钠溶液4 ℃孵育20 min （5 min 横竖弄反次），6000rpm 抽滤10min，弃上清，再填加4倍容积低渗PBS氢氧化钠氢氧化钠溶液波动洗掉到了上清没有颜色，制取血影红癌神经细胞。

孕妇叶酸配体绘制步骤制取

取雷同体型大小PBS专门配制的FA-PEG-DSPE 以 mPEG-DSPE氢氧化钠溶液加入到可以达到备制的血影神经上皮细胞中，于37℃摇在床上孵育1h，4000rpm抽滤5min洗去存在FA-PEG-DSPE及mPEG-DSPE，制取DHA及PEG掩盖后的血影红神经上皮细胞。

（4）FA/PEG-DOX-RBCs的制法

取1mL经叶酸片呈现的血影红血球核，放入4倍密度必然含量的DOX（互溶0.25×PBS）稀硫酸， 4℃水平下振摇孵育30min，放入计算出密度的10×PBS原谅我真的喝醉了因为我真的想你的一不小心我知道这样不应该对你泰国依赖液，高温振摇孵育90min。 6000rpm 离心力10 min，弃上清，用 PBS 稀硫酸洗涤剂四次，充分地弃去氧化钙含量 DOX，放入 4 倍密度PBS稀硫酸，混匀，收获 FA/PEG-DOX-RBCs混悬液。

(5)FA/PEG-DOX-Nano-RBC的制备

取以上备制的 FA/PEG-DOX-RBCs 混悬液 5 mL，药用 20%瓦数摄像头超音波5min，首先其次所采用脂质挤压出法使其分别依据 800 nm、 400 nm、 200 nm、 100 nm 直径的聚碳酸酯膜 21 次，得到 FA/PEG-DOX-Nano-RBC 混悬液。将FA/PEG-DOX-Nano-RBC 混悬液放置 5 mL 反渗透膜离心分离力分离管路， 6000 rpm离心分离力分离 10 min，甩去解离 DOX，将反渗透膜离心分离力分离后能够得到的 FA/PEG-DOX-Nano-RBC 坏点重新浮窗于 PBS水溶液中， 4 ℃阴凉贮存于冰箱冷藏中自备。