HRP内吞实验-UDP糖丨MOF丨金属有机框架丨聚集诱导发光丨荧光标记推荐西安pg电子娱乐游戏app 生物

称取1mg HRP液态粉末状，成为 1mL ddH O，即是 1mg/mL，再对应稀释溶液成0.0001 、 0.0002、0.0004、0.0008 、 0、0016、0.0032、0.0064、0.0128、0.0256ug/mL,主要取_10uL，添加100uLTMB显色底物，15min后放入50uL 2M H,SOs停止发应，即刻法测定OD450值，以HRP质为横地理坐标，OD450数值为纵地图坐标，建模HRP酶朝气基准等值线。

二、铺板、转染

三、核查神经元吞入的HRP含碳量

1、转染后6h后，将6孔板中的塑造培养基的配制吸出，取500uL DPBS沿皿壁加盟到每位孔中，洗滌

组织单次，完毕赋予 2mL无FBS的 DMEM 养成基使细胞膜饥饿16h 。

2、事前用无 FBS 的 DMEM 系统配置1mg/mLHRP，并阴凉工作，16h后塑造培养教育皿中的塑造培养教育基吸出，

每孔中放入80OuL的HRP稀硫酸置37℃，5%CO2培养教育箱中10min 。

3、10min后立己经上清注入到 15mL离心分离管上回笼，DPBS清洗人体细胞一些，然后每孔内加入

200uL 胰酶，代谢受损细胞。参与 1mL DPBS重悬内部并更换到1.5mLEP分液漏斗，3000rpm ,4℃离心分离2min,从复该步单次，上清放干，3000rpm，4℃抽滤1min，将上清吸掉净。4、配值裂解液，用强RIPA裂解液（ 50mM Tris-cl pH7.4，150mM Nacl，1%TritonX-100 )

里加入100×PMSF和50×PIC两类血清酶**剂。过后主要取50uL将内部滤渣重悬，并放上混悬仪上 4℃裂解细胞核1.5h。

5、待生殖细胞有效裂解后14000rpm，4℃离心法10min，将上清改变到新的 1.5mLEP管上。

6、取5uL生殖细胞裂解液成为到 45uLddH :O中，溶解稀释10，涡旋式混匀后取 10uL加到96孔板中，

做3个水平线样，用排枪加如100uL TMB 显色底物(TMB bufferA与 TMB bufferB等密度混和)，温度避光显色15min，填加50uL 2M H zSO4中止现象，请马上用酶标仪测试OD450值。

7、表明原则身材曲线统计細胞吞入的HRP纯度。

TMB bufferA : 500mL

NaAc·3H zO 13.6 g

Citric Acid1.6 g

30% HzO:0.3 ml

Add ddH O to 500 ml

TMB bufferA : 500mL

TMB (first dissolved in 3 ml DMSO) 0.15 g

EDTA-2Na 0.2g

Critic Acid 0.95

gGlycerol 50 ml

Add ddH 20 to 500 ml

上海pg电子娱乐游戏app 菌物社会可出具多种多样酶无机化学食品收录有β-半乳糖被氧化酶，应力松弛球核蛋白酶，脱氧核糖核酸酶I，胶原酶，梭菌球核蛋白酶，高密度脂蛋白酯酶等