磁珠法是一种种固相平台不可逆转化固定好(SPRI)的离心分离纯化措施,主要的工作原理为:在与众不同浓硫酸浓度的PEG(polyethylene glycol;聚乙二醇)中,会各不相同场面描写强弱的DNA吸附物在磁珠的羧基装饰层上,以下DNA需要再分解在池中,依据这个来冲洗掉收废。
实验操作动用的磁珠划分为5层复合(图1;直径约1廊坊可耐电器有限公司),由内之外逐个为:聚苯氯氯乙烯物料的内在、超顺磁物料(一般为四阳极氧化三铁)、**层聚苯氯氯乙烯物料、**层超顺磁物料以其表皮干硬的羧基掩盖层。干硬的表皮更助进核酸与羧基掩盖层组合。
图1.磁珠各层组成成分
在全部系统中,PEG的有机废气浓度是影响力DNA环保再生资源回收的决定了性原则(某些原则还包含DNA深浅和溶度、盐铝离子溶度、用的时间等等等等)。DNA在必定氨水浓度的PEG产生要求下,NaCl或MgCl2使得下,使DNA会发生烘干不起作用,大分子构象会会发生激增变换,由线状被降低导致卷起球状,随后聚集地奠定,一同随PEG氧分子量、浓度值值或者盐浓度值值的有差异 ,有差异 高度的DNA可能被选择性的乳浊液下来。在磁珠管理体系中,不同氧分子量(普遍的是PEG8000)的PEG的模块主要是是与盐化合物同样帮助,改动不相同尺寸DNA的原子构象,的同时提升体系建设的浓稠阶段,使磁珠在至少占据透明桌面睡眠状态,不会沉降,提升磁珠在前景地段的摩擦与孤立,可以提升核酸与磁珠的密集能力与体验,除此外,PEG与蛋清质体现了相匹配性,也可快速清理备样中的蛋清质。
图2. 磁珠与DNA配合提醒图
当今主流的哲学理论观点,存在PEG和盐阴阳离子生态环境中的DNA,因脱水过滤角色而造成原子核构象优化后,会曝光出磷酸骨架子上丰富的带负带电粒子的磷酸基团,与接触面带负带电粒子的羧基磁珠融入。负负带电粒子相互之间的角色是犹豫带正带电粒子的盐化合物的角色(如Na+;图2)。带负电的磷酸基团借由解离的盐阴阳离子(如Na+)与羧基产生铁离子桥,使DNA被特喜欢的人吸附物到羧基磁珠接触面。当PEG和碱土金属被取除时候,添加水性树脂大分子,会很快彻底的水化DNA,取消其第三责任险当中的阳离子相互之间能力,让吸附剂到磁珠的DNA被纯化过来。
运营的中应步下面的图3(0.6x表示DNA液体表面积的0.6倍;该倍率要标准相互之间不同于的實驗体制自动监测修正):
图3.磁珠法拆分400-600bp DNA片断的方法流程
一旦仅仅只是拆分纯化单条带PCR生成物,.我平常实用1.2x的磁珠,与PCR物质在EP管口混合型后放磁力链架子上1分钟左右,丢掉上清,70%双氧水洗條两三次后温度干澡,最后将EP管从磁链接架子上拆卸,TE也可以软水与磁珠混,第三放回ed2k架取上清,大部分进程用时约15小时。
磁珠DNA剥离 法中数次实用了磁链接架,来使磁珠聚并成简便洗去洗刷液。普通德国磁链接架(专门针对EP管某些96孔PCR板)约1000-5000国民币,可是们检测室(中华浮游菌物学校浮游菌物菌物多样化性与进化史科学科研院-演变什么是基因组学深入分析室)要能在3D复印机自主复印并用到了稀士的原材料加工开发的高防磁悬浮轴承铁,感觉竟然好于房地产业化商品。具体实施加工开发技巧咱们会在在这之后的更新公司绍。
硅基磁珠 | 固相萃取磁珠 |
PuriMag Si-benzylchloride 苄基氯修饰磁珠 | |
PuriMag Si-benzol 苯基修饰磁珠 | |
PuriMag Si-Cyclohexane 环己基修饰磁珠 | |
PuriMag Si-C18 十八烷基修饰磁珠|Dynabeads® RPC 18等效磁珠|C18磁珠 | |
PuriMag Si-C12 十二烷基修饰磁珠|Dynabeads® RPC 18等效磁珠|疏水磁珠 | |
PuriMag Si-C8 辛基修饰磁珠|疏水磁珠|Dynabeads® RPC protein等效疏水磁珠 | |
PuriMag Si-Cl氯丙基修饰磁珠 | |
PuriMag Si-C3 丙基修饰磁珠|Dynabeads® RPC protein等效疏水磁珠 | |
偶联用磁珠 | |
PuriMag Si-DEAE 单核硅质DEAE弱阴离子交换磁珠 | |
PuriMag Si-SH 巯基修饰磁珠 | |
PuriMag Si-Epoxy 环氧基修饰磁珠|环氧基磁珠|硅包覆环氧基磁珠 | |
PuriMag Si-COOH 羧基修饰磁珠|羧基磁珠|硅羧基磁珠 | |
氨基磁珠|硅包覆氨基磁珠|PuriMag Si-NH2 氨基修饰磁珠|amine magnetic bead | |
核酸提取磁珠 | |
核酸DNA/RNA提取纯化磁珠 氨基修饰 | |
核酸DNA/RNA纯化提取磁珠 羧基修饰 | |
DNA提取硅羟基磁珠|RNA提取磁珠|核酸提取磁珠 | |
GMA磁珠 | 亲和素磁珠|亲和素标记磁珠|avidin magnetic bead |
巯基磁珠PuriMag G-SH | |
NHS磁珠|高载量PuriMag G-NHS磁珠 | |
叠氮磁珠|Azide 磁珠|炔烃标记蛋白点击偶联|PuriMag G-Azide Beads|Azide magnetic bead | |
蛋白L磁珠|Protein L磁珠|Protein L magnetic bead|抗体纯化|免疫沉淀 | |
蛋白A/G磁珠|Protein A/G磁珠|Protein A/G magnetic bead | |
蛋白G磁珠|ProteinG磁珠|Protein G magnetic bead | |
蛋白A磁珠|Protein A磁珠|Protein A magnetic bead|免疫沉淀|抗体纯化 | |
生物素磁珠|生物素修饰磁珠|biotin磁珠|biotin magnetic bead|PuriMag™ G-Biotin | |
甲苯磺酰基活化磁珠|PuriMag G-Ts聚合物磁珠 | |
氨基磁珠|高密度氨基磁珠|聚合物磁性微球|PuriMag G-NH2|amine magnetic bead | |
羧基磁珠|羧基修饰磁珠|高密度羧基磁珠|聚合物羧基磁珠PuriMag G-COOH|carboxyl magnetic bead | |
羟基磁珠聚合物包覆磁珠PuriMag GS-OH(短臂) | |
环氧基磁珠|聚合物包覆磁珠PuriMag G-Epoxy|高环氧基密度磁珠| | |
链霉亲和素磁珠|SA磁珠|亲和素磁珠|PuriMag G-streptavidin 高biotin结合容量 | |
聚苯乙烯(PS)包覆磁珠—阳离子交换 | |
聚苯乙烯(PS)包覆磁珠—阴离子交换 | |
聚苯乙烯(PS)包覆磁珠—表面氯甲基 | |
聚苯乙烯(PS)包覆磁珠—表面环氧基|环氧基磁珠|高密度环氧基磁珠 | |
聚苯乙烯(PS)包覆磁珠 | |
聚苯乙烯(PS)包覆磁珠—表面羧基|羧基磁珠|高密度羧基 | |
聚苯乙烯磁性微球 | 羧基磁珠|化学发光磁珠|发光免疫磁珠 |
链霉亲和素磁珠|1微米 SA 磁珠|免疫发光磁珠|链霉亲和素标记磁珠 | |
超均一单分散磁珠表面二氧化硅包覆PuriMag-Homo-SiO2 | |
超均一单分散磁珠表面聚合包覆PuriMag-Homo-polymer | |
琼脂糖磁性微球 | 偶联用琼脂糖磁珠 |
羧基活化琼脂糖磁珠|羧基琼脂糖微球|Magarose-COOH | |
氨基活化琼脂糖磁珠|氨基琼脂糖微球|Magarose-NH2 | |
NHS活化琼脂糖磁珠|NHS琼脂糖微球|Magarose-NHS | |
环氧基活化琼脂糖磁珠|环氧基琼脂糖微球|Magarose-Epoxy | |
CNBr活化琼脂糖磁珠|CNBr琼脂糖微球|Magarose-CNBr | |
醛基活化琼脂糖磁珠|醛基琼脂糖微球|Magarose-CHO | |
琼脂糖磁性微球|琼脂糖磁珠|Magnetic agarose bead | |
蛋白纯化琼脂糖磁珠 | |
Protein A/G包被琼脂糖磁珠|Protein A/G包被琼脂糖微球|Magarose-ProA/G | |
Strep-tag II蛋白纯化磁珠|Strep-Tactin琼脂糖磁性微球 | |
DEAE弱阴离子交换琼脂糖磁珠 | |
肝素包被琼脂糖磁珠|Heparin包被琼脂糖微球 | |
GST融合蛋白纯化用琼脂糖磁珠 | |
His-tag标签蛋白纯化磁珠Magarose TED | |
组氨酸标签蛋白纯化磁珠|Magarose NTA | |
His标签蛋白纯化磁珠|Magarose IDA | |
其他 | 羧基磁珠|羧基磁性微球|羧基磁性纳米粒子 |
Fe3O4磁核|超顺磁性纳米氧化铁|铁氧体磁珠|200-400nm磁性纳米粒子 | |
PCR产物纯化磁珠|Agencourt AMPure XP等效磁珠 | |
免疫磁珠 | 链霉亲和素磁珠 |
链霉亲和素-生物素(SA-Biotin) | |
Streptavidin/SA/链霉亲和素 | |
蛋白偶联链霉亲和素共价连接于固相载体表面 | |
结合生物素化抗 体、核酸、蛋白等配体分子 | |
免疫沉淀磁珠Protein A/G | |
Mag NH修饰生物配体快速偶联磁珠 | |
Magrose NHS修饰生物配体快速偶联磁珠 | |
基础磁珠 | 羟基磁珠Mag OH/核酸提取和纯化设计 |
羧基磁珠Mag COOH | |
超顺磁性、快速磁响应性、丰富羧基官能团、单分散性和亚微米尺度粒径 | |
蛋白分离纯化羧基磁珠 | |
羧基磁珠高载量蛋白/多肽/寡聚核苷酸/**分子 | |
氨基磁珠Mag NH2 | |
单分散性氨基磁珠 | |
寡聚核苷/蛋白/多肽-戊二醛-共价偶联微球表面 | |
葡聚糖纳米磁珠Dextran | |
超顺磁性氧化铁颗粒粒径为13-15 nm之间 | |
蛋白纯化磁珠 | His-tag蛋白纯化磁珠 |
IDA-Nickel | |
IDA-Cobalt | |
IDA-Nickel Kit | |
IDA-Cobalt Kit | |
GST融合蛋白纯化磁珠 | |
融合蛋白纯化磁珠GSH | |
融合蛋白纯化磁珠GSH kit | |
Strep-tag II蛋白纯化磁珠 | |
新型功能化材料Strep-tag II | |
新型功能化材料蛋白纯化磁珠 | |
Magrose Strep-Tactin | |
Magrose Strep-Tactin kit | |
rp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys | |
肝素磁珠 | |
Magrose Heparin | |
快速的磁响应性的肝素磁珠 | |
磁珠表面偶联肝素带有负电性硫酸根离子基团 | |
DEAE磁珠 | |
Magrose DEAE弱阴离子交换磁珠 | |
快速的磁响应性DEAE磁珠 | |
离子交换能力的DEAE磁珠 | |
**的蛋白结合能力的DEAE磁珠 | |
离子交换配基为二乙氨乙基的DEAE磁珠 | |
抗体纯化磁珠 | |
Protein A/G抗体纯化磁珠 | |
Protein A Antibody Purification Kit | |
Protein A/G Antibody Purification Kit | |
Magrose ProteinA Antibody Purification | |
核酸提取磁珠 | 病毒DNA/RNA提取试剂盒Viral DNA/RNA Kit |
游离DNA提取试剂盒Circulating DNA Ki | |
唾液基因组DNA提取试剂盒Saliva DNA Kit | |
粪便总DNA提取试剂盒Stool DNA Kit | |
血液基因组DNA提取磁珠试剂盒Blood DNA Extraction Kit | |
DNA片段筛选试剂盒(磁珠法)DNA Select Isolation | |
PCR产物纯化试剂(磁珠法)PCR Purification | |
凝胶回收试剂盒 | |
质粒 DNA 小量抽提试剂盒 |