荠菜[Capsella bursa-pastoris (L.) Medicus]是一种十字花科1年或好几年生天然绿植的绿植的，別称护生草、荠荠菜、香善菜、田儿菜、雀雀菜、地米菜等0。荠菜包含荠菜酸、生物技术碱、黄吩噻嗪有机化合物和很多蛋白质、维生素D等因素，具备非常丰富的营养素和很高的药用功效观价值观12-3]。其实在荠菜摘采期和存贮期短，有效的调低了其服食商业价值。因此，探析荠菜的冷冻、存贮和工艺步骤中的显老研究进展，对綜合激发再生利用已有的信息包括关键性的积极意义。

  近两年前，对荠菜的理论科学设计最主要的随意性在速冻最简单的方法和其营养摄入化学有害物品组成成分的生成上，然而 从影响力荠菜细胞皮肤松弛的酚类化学有害物品和涉及到酶类工作方面理论科学设计从没包括。涉及到用料是因为，过钝化物酶特异性的加强是草本花卉细胞皮肤松弛的**显著特点之中，酚类化学有害物品则是过钝化物酶意义的就直接底物。刚开始理论科学设计结论是因为，在荠菜细胞皮肤松弛的的过程中，总酚和氧化钙量酚类量上升，一起，POD活力过大，后者呈**正一些。酚类物料与植被公司的哀老和褐变密切联系一些。本实验室荠菜中的酚类物料签别和过钝化物酶底物基本特性，得以为荠菜的贮存和储藏加工工艺保证肯定方法论措施。

具体方法

措施一：酚类产品的分离出来

  酚类化合物的生成手段[13]:用甲醇最为石油醚，将荠菜和甲醇，并按照1:2(g/mL)的分配比例通过磨研，得提炼液供检测研究分析。

办法二： 酚类有机化合物的紫外线-可見光谱分析扫苗

  取3mL荠菜酚类的物质添加液放置到石英石比色皿中，在200~500nm紫外光部位扫苗，基线扫苗以甲醇用于标准液。也用甲醇自制浓度值0.1 mmol/L的酚类标样实现光谱图图扫描仪，与检样红外光谱图代谢光谱图图图实现比114]。

方法步骤三：酚类化学物质的**色谱仪色谱剖析

  赋予2.0mL荠菜酚类物获取液，以0.22 um有机物膜进行过滤应急。色谱因素:液相色谱柱Agilent ZORBAX SB-Cis(46mm×250mm，5um);流相用乙腈、水，乙腈体型由5%攀升至35%;柱温30℃;流动速度1 .0mL/min，检查光的波长为280nm，进样表面积为20 uL。

方案四：过被氧化物质酶液的提纯和酶活检验

  粗酶液的提炼:更准称取荠菜叶轮试样0.5g，放在研钵，放一些石英石砂，倒入pH7.8的瞬散绫作他6mL使用研磨机，抽提后于超低温400Or/min离心力，20min后回收利用上清液就是POD粗酶液。

最简单的方法五：过空气铁的氧化物酶抗逆性检测

  的反应机制中顺次假如2.0mL 0.1mol/L醋酸钠-乙酸钠缓冲区液(pH5.4)，1mL酚类底物，50uL粗酶液，注入0.1mL 0.75% H:O:饱和溶液，很快错乱混匀，于A4oo处测其吸光度，每30s读数1次，手表3~5min。以磷酸保护液充当酶液算作乱码管，以每小时在460nm吸光度发生改变0.001为1个酶活力性单位名称。

方式 六：酚类底动物群类和有机废气浓度对POD青春活力的干扰

  按底鱼类类分离为焦性没食子酸、没食子酸、绿原酸、儿茶酚、表儿茶酚、美式咖啡酸，底物酸度分离为4、6、8、 10mmol/L更改，以后放入30℃水浴锅内静置10min，拿出后一系列冷却于光谱460nm检测法吸光度。以底物质量浓度为横平面坐标，以△Asoo为纵坐标定位，设计底物密度拟合曲线。

报告与分享

做实验的时候将四种酚类原则印刷品开展太阳光的紫外光线扫一扫并与荠菜中酚类化合物截取液的太阳光的紫外光线代谢光谱仪开展对比(表1)。融入图1，荠菜酚类添加物的吸附峰形有条个显然的主峰，吸附光波长在213nm。其荠菜酚类有机物抽取物与标样焦性没食子酸的分光光度计-探及扫视谱图波形参数和**光波波长高不符(图1和表1)。而与儿茶酚、绿原酸和酪氨酸等标样的汲取峰有所不同(表1)。那么，判定荠菜中的大部分酚类物资为焦性没食子酸。

图1荠菜酚类拆分物(A)与焦性没食子酸标样(B)紫外线挥发扫一扫图

结语

  綜合荠菜酚类添加物的红外光谱扫描器和**液质色谱的分折结局测出:荠菜中含带焦性没食子酸、咖啡服务酸、表儿茶酚3种酚类的有害物质，以焦性没食子酸为之主要。荠菜中酚类的有害物质的吸取吸光度是213nm。除外，荠菜酚类提现物的**高效液相色谱图示保存时为4.5min处的酚类有害物质还迫切需要进那步判别。荠菜POD做用底物为绿原酸，酶促响应的底物溶度为8mmo1/L。

二氢若丹明123

二氢乙锭

CF640R Tyramide

CF594 Tyramide

CF568 Tyramide

CF543 Tyramide

CF488A Tyramide

CF350 Tyramide

Biotin-XX Tyramide

2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐

10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine

氯化硝基四氮唑兰

4-甲基伞形酮磷酸二钠盐三水

MUP, free acid

1, 6-二磷酸蔗糖钠

Chromogenic Phosphatase Substrate Sampler

5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸酯对甲苯胺盐

BCIP Red

BCIP Pink

XTT 钠盐

Resorufin (high purity)

Resazurin, Sodium Salt

噻唑蓝

2,3-二(4-甲基苯基)-1H-四唑-3-鎓-5-甲腈氯化物

5-溴-4-氯-3-吲哚-Β-D-仟维二糖糖苷

zl 02.03