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琼脂糖珠的活化以及sepharose 4B与蛋白质结合实验步骤!
发布时间:2020-07-09     作者:zhn   分享到:

琼脂糖珠的纯化或是sepharose 4B与血清质配合进行实验部骤!

西安pg电子娱乐游戏app 生物科技有限公司提供了许多功能化的琼脂糖珠。这些功能性产品是琼脂糖与胺,醛,马来酰亚胺或者其他基团组合,琼脂糖和生物分子之间反应形成的交联物。提供表面功能性琼脂糖珠、生物素标记的琼脂糖珠、氨基酸包琼脂糖珠、谷胱甘肽/GST包琼脂糖珠、蛋白A/G包琼脂糖珠、NTA/HIS标签琼脂糖珠、凝集素涂层琼脂糖珠、磁性琼脂糖珠;琼脂糖珠粒大小均匀,粒径在50~150微米之间。这些活性珠具有多个官能团,可用于将各种生物配体共价连接到珠表面。共价键配体具有很高的稳定性,适用于各种生物分子的纯化、捕获和分析。

 sepharose 4B

琼脂糖在水中一般加热到90℃以上溶解,温度下降到35-40℃时形成良好的半固体状的凝胶,这是它具有多种用途的主要特征和基础。琼脂糖凝胶性能通常用凝胶强度表示。强度越高,凝胶性能越好。琼脂糖珠的的主要用途:血净化后用内内毒素亲和过滤剂

 

琼脂糖珠的纯化环节:

1.将处理好的琼脂糖珠按1g加1ml 0.1mol/L的PH9.2碳酸盐缓冲液置冰水浴中平衡2h。

2.按10g湿重琼脂糖珠加2g  CNBr的比例,称取CNBr,再按2g CNBr溶于3ml上述缓冲液中电磁搅拌10min,促进溶解(注意,CNBr有剧毒,必须在良好的通风橱中进行)。

3.在冰浴电磁搅拌下,将CNBr溶液滴入4B珠中,并需要在2min内完成,滴加2mol/L的NaOH,用PH试纸检测PH维持在11左右,冰浴反应10min。

4.将上述4B珠倒入布氏漏斗中,用于预冷4-10度的上述缓冲液2-3min内完成,约抽洗相当于4b珠25倍体积的液体,立即交联蛋白。

sepharose 4B

货品的CNBr活性sepharose 4B进行处理形式

如购买到已用CNBr活化好的4B珠,仅需要去除保护剂的同时、膨胀好后立即交联蛋白。

处理方法:称取CNBr-sepharose 4B,于砂芯漏斗中用0.001mol/L HCL浸泡,在15min内用50倍的以上的0.001mol/L HCL抽洗及膨胀(1g干活化4B约有3-4ml体积),抽干后立即与配基欧联。

sepharose 4B

产甲烷4B与核蛋白偶联研究环节

将活化好的琼脂糖珠加到已用0.1mol/L PH8.4 NaHCO3 缓冲液( NaHCO3 16.8g溶到2000mlH2O中)琼脂糖珠与蛋白量的比例为:可按1g干活化的4B珠加到4ml含有10-15ml IgG蛋白,或按10g湿基4B珠加到10ml含有30-40mg IgG蛋白。置4度条件下,摇转仪交联过夜,或者室温4h以上(20度左右)。

交联后的4B-蛋白珠,用上述液体以20倍左右的体积抽洗去除未结合蛋白,然后用0.1mol/LPH8.2HCL-甘氨酸缓冲液 (5倍体积左右)(0.2mol/L hcl,16.8ml;0.2mol/L GLY50ml水加置100ml)洗去非特异吸附蛋白。上述两步洗液皆收集测定其蛋白含量。

 

pg电子娱乐游戏app 生物制品出售的琼脂糖珠厂品:

Agarose beads, Glutathione/GST Labeled  4B;Glutathione/GST琼脂糖糖珠4B

Agarose beads, glucose functional;常见葡萄品种糖基本功能化琼脂糖珠

Agarose beads, Epoxy activated;环氧树脂交联琼脂4B糖珠

Agarose beads, DBCO functional;DBCO功能化修饰琼脂糖珠

Agarose beads, Concanavalin A labeled  4B;刀豆球蛋白A交联琼脂4B糖珠

Agarose beads, CNBr activated ;CNBr-4B琼脂糖珠

Agarose beads, CDI activated  

Agarose beads, cqyboxylic functional;喹啉羧酸呈现琼脂糖珠

Agarose beads, boronic acid functional;亚硼酸功能化琼脂糖珠4B

Agarose beads, Biotin Labeled;生物素标记琼脂糖珠 4B

Agarose beads, azide functional;叠氮职能化琼脂糖珠

Agarose beads, amine functional;氨基遮盖琼脂糖珠

Agarose beads, alkyne functional;炔基遮盖琼脂糖珠

Agarose beads, Aldehyde activated;醛基产甲烷琼脂糖珠

Agarose beads, carboxylic functional;羧基装饰琼脂糖珠

Agarose beads, heparin conjugated;肝素体现琼脂糖珠

Magnetic Agarose beads, Streptavidin Labeled;链霉亲和素掩盖琼脂糖磁珠

Magnetic Agarose beads, GST labeled;GST琼脂糖凝胶4B 

Agarose beads, thiol functional;巯基效果化琼脂糖珠

Agarose beads, Streptavidin Labeled ;链霉亲和素标记琼脂糖珠4B

Agarose beads, pyridyl disulfide functional 4B吡啶基二硫化物功能化琼脂糖珠4B

Agarose beads, Protein G Labeled ;蛋白G琼脂糖珠

Agarose beads, Protein A Labeled ; 蛋白A琼脂糖珠

Agarose beads, PEG functional;聚乙二醇突显的琼脂糖珠

Agarose beads, mannose functional;珠露糖功能模块化装饰琼脂糖珠

Agarose beads, maleimide functional;马来酰亚胺绘制琼脂糖珠

Agarose beads, Iodoacetyl functional  4B;碘乙酰基修饰琼脂糖珠4B

Agarose beads, hydrazide functional  4B;酰肼体现琼脂糖珠

Agarose beads, hepqyin conjugated 4B;肝素体现琼脂糖珠

Sepharose beads-BSA;琼脂糖珠偶联牛血清正蛋白质

Sepharose beads-HAS;琼脂糖珠偶联人血纯洁核蛋白

Avidin Sepharose;琼脂糖珠化学交联亲和素

Recombinant Protein A, peroxidase (HRP);辣根酶标记的重组蛋白A

Recombinant Protein A, agarose beads;琼脂糖珠偶联重组蛋白A

Recombinant Protein G, peroxidase (HRP);辣根过氧化物酶标记重组蛋白G

Recombinant Protein G, agarose beads;琼脂糖珠偶联重组蛋白G

Green fluorescent protein-agarose bead,绿色荧光蛋白GFP修饰琼脂糖珠

allergen-coated Sepharose beads.过敏症状原表层琼脂糖珠

avidin-Sepharose beads.亲和素体现琼脂糖糖珠

Interferon-Sepharose beads.侵扰素实用功能化琼脂糖珠

Sepharose beads-protein;蛋白酶装饰琼脂糖珠

streptavidin sepharose beads;链霉亲和素琼脂糖珠

polylysine-coated beads;聚赖氨酸铝层琼脂糖珠

polymyxin-sepharose;多粘菌素修饰语琼脂糖珠

mannose-sepharose beads ;珠露糖掩盖琼脂糖珠

BSA-sepharose beads ;牛血清廉核蛋白呈现琼脂糖珠

HSA-sepharose beads ;人血清廉淀粉酶呈现琼脂糖珠

Protein G-Sepharose beads;G蛋白修饰琼脂糖珠

phenyl-sepharose beads;苯基琼脂糖珠

leptin-Sepharose beads;瘦素交联琼脂糖珠

transferrin-Sepharose beads;转铁核蛋白突显琼脂糖珠

umicolchicine-Sepharose beads;雨暗仙素包琼脂糖珠

peptide-conjugated Sepharose beads;胜肽包裹琼脂糖珠

albumin-Sepharose beads ;白球蛋白修饰语琼脂糖珠

dextran-Sepharose beads ;葡聚糖偶联琼脂糖珠

polymyxin B-Sepharose;多粘菌素B修饰琼脂糖珠

Avidin Sepharose;亲和素包裹琼脂糖珠

Recombinant Protein A, peroxidase (HRP);辣根酶修饰重组蛋白A

Recombinant Protein A, agarose beads;蛋白A 修饰琼脂糖珠

Recombinant Protein G, peroxidase (HRP);辣根酶标记重组蛋白G

Recombinant Protein G, agarose beads;整体上市核蛋白交连琼脂糖珠

fibronectin-Sepharose beads;纤维素蛋清偶联琼脂糖珠

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Esterase sepharose Beads;酯酶遮盖琼脂糖珠

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Sepharose 4B beads

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PLL-Sepharose beads;赖氨酸体现琼脂糖珠

GST-Sepharose beads;GST融合蛋白琼脂糖珠

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Glutathione Agarose Resin谷胱甘肽琼脂糖树脂材料

Biotin Agarose Resin生物体素琼脂糖树酯

Streptavidin 6HC Agarose Resin;链霉亲和素6HC琼脂糖树脂

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Streptavidin-Sepharose Bead;链霉亲和素-琼脂糖凝胶珠

Calmodulin-Sepharose Beads;钙调血清琼脂糖抑菌凝胶珠

Plasmin Sepharose Beads;纤溶酶琼脂糖珠

Urokinase Sepharose Beads;尿激酶琼脂糖珠

Protein A Sepharose Column;蛋白A琼脂糖凝胶柱

Heparin Sepharose Column;肝素琼脂糖凝露柱

Protein A Sepharose;蛋白A琼脂糖凝胶

Glutathione Sepharose;谷胱甘肽琼脂糖妇科凝胶

Protein A/G Sepharose;重组蛋白A/G-琼脂糖凝胶珠

Protein G Sepharose;重组蛋白G-琼脂糖凝胶珠

Protein L Sepharose;蛋白质L-琼脂糖

Heparin Sepharose;肝素琼脂糖凝胶6FF

Glutathione Agarose;谷胱甘肽琼脂糖

NTA-Agarose

Fe-NTA Agarose

Ni-IDA Agarose

IDA Agarose

Alprenolol Agarose

Ni-NTA Agarose

Co-NTA Agarose

INDIGO Ni-Agarose

Zn-NTA Agarose

Rho1D4 Agarose XL

Al-NTA Agarose

DEAE Agarose

Butyl Agarose

Gold-Ni-NTA

Fe3O4-SiO2Ni-NTA

Ni-NTA resin

Ni-NTA-Nanogold

PLL-PEG-NTA

Ni-NTA Magnetic Agarose Beads

Fe3O4@PAM@NTA-Ni

Ni-NTA Spin Columns;挽回永磁铁nm微粒

Ni-NTA Superflow Columns

HisSep Ni-NTA Agarose Resin (His标签蛋白琼脂糖纯化树脂)

Ni-NTA Agarose beads ;Ni-NTA琼脂糖珠

NHS activated Agarose beads ;滋养脂绘制琼脂糖珠

Ni-NTA Spin Columns

HisSep Ni-NTA Agarose Resin (His标签蛋白琼脂糖纯化树脂)

fibronectin-Sepharose beads;氯纶蛋白酶偶联琼脂糖珠

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Esterase sepharose Beads;酯酶琼脂糖珠

 

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