制法填补柱填装的六个步骤(含填补液相色谱柱的清洗最简单的方法)一， 添加液相色谱柱的筹备

目前填充柱主要有两种：不锈钢柱和玻璃柱。一般是内径2-5mm，长0.5-10m的不锈钢或玻璃管。其它材料已经很少用了。不锈钢柱坚固耐用。玻璃柱的惰性好，但易碎。

1. 新填充色谱柱清洗

正规商品柱通常是经过清洗密封的干净柱子，不会漏气，不需要清洗处理，可以拿来直接填充固定相。

某些厂家代理商或本人适用不锈铁管或夹层玻璃管的柱子都要清理看看。不锈钢板柱子：先关察一会柱子有哪些损坏，干裂。先用10%NaOH拆洗，用杭州自来水喷洗，后来用注射用水、异丙醇喷洗，吹干应急。波璃柱子：相同先查看说一下柱子有何划痕，干裂。用铬酸处理液泡浸刷洗，供水洗冲，继续使用蒸馏水、二甲苯清洗阴道，烘干处理后备力量用。

2. 用过的填色离子交换柱的除垢

慢慢敲击倒出里面的固定相填料，用空气吹一下。先用溶解固定液的有机溶剂浸泡清洗，随后可以参照新柱的清洗方法。

二、稳固液涂渍

对于多空高分子多孔微珠，吸附性，多孔硅胶等，例如，GDX-x，Porapak, 分子筛等，无固定液，直接填充就行。

而对于担体（质粒）上文涂渍一定液的一定相制法相应。

1.估计所需要填充固定相的体积用量（担体用量）

例如2m x 2mm ID的填充柱，担体用量为

V(ml)=（ID/2）*(ID/2)*π*L*1.05=0.1*.0.1*3.14*200*1.05=6.6ml注：V----担体密度或填色量（ml），ID----柱內径(cm)，ID/2----直径，π----园周率，柱长（cm）,1.05----添加5%的商业险担体裕量。

2.确定液的涂渍（静止涂渍法）

例如，用上述柱子制备10%邻苯二酸二壬酯（DNP）固定液的Chromosorb W担体的固定相：

摄入量筒量取6.6ml的首先需要干热好的Chromosorb W担体，在天枰方面称重的（列如10g，在这是举例子，号码方便于计算，预期操作步骤以预期称重是以）。其次在100ml烧小杯，称取10%*10g=1gDNP，倒入8-10ml（比6.6ml要大，保障并能超出运用担体表面）异丙醇（稀释剂对比调整液的这使用说明）溶解度，将10 gChromosorb W HP的膜蛋白悄悄倾入，使的膜蛋白充分水的压强。

将烧杯置于通风柜中，自然干燥或在红外灯下干燥，并不断搅拌至溶剂挥发干，然后移至80℃烘箱中干燥4h,备用(烘箱温度取决于固定液的性质，例如OV-101固定液在110度烘烤)。

左右是静态变量涂渍妙招，另一另外 抽真空涂渍法（略）。

三、自动填补离子交换柱的自动填补

一般采用真空泵抽气法。在填充柱的出口（接检测器一端）塞一些玻璃棉，用合适内径的软管（套紧柱子出口和真空泵）接到真空泵上，注意不要漏气。用一小漏斗接色谱柱的（进）口（接汽化室一端），开启真空泵，分次把制备好的色谱固定相填充物从漏斗填入柱内，同时不断轻敲柱壁，使其填充得均匀紧密。直至填料无法进入，头上留一点空隙塞上玻璃棉即可。标记好柱子的进口和出口。

图2. 液相色谱柱填装提醒图

四、添充气相色谱柱的氧化

将色谱柱进口与进样口相连，出口端先不接检测器，以10-15mL/min流量通入载气(N2)。在高于柱子实际使用的最高温度10-20度，但必须低于柱子固定相的最高使用温度10-20度的条件下老化12-24 小时。然后连接检测器观察基线是否平直。

五、气相色谱柱的保留

做好标记，例如，固定液信息，载体，固定相配比，日期，用途等。密封色谱柱的两端。

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