提纯添充柱填装的4个具体步骤(含添充气相色谱柱洗步骤)一， 选中离子交换柱的注意

目前填充柱主要有两种：不锈钢柱和玻璃柱。一般是内径2-5mm，长0.5-10m的不锈钢或玻璃管。其它材料已经很少用了。不锈钢柱坚固耐用。玻璃柱的惰性好，但易碎。

1. 新填充色谱柱清洗

正规商品柱通常是经过清洗密封的干净柱子，不会漏气，不需要清洗处理，可以拿来直接填充固定相。

有些人厂或她挑选不锈管材或玻离管的柱子是需要进行维护清洁两下。不銹钢柱子：先关察两下柱子有设破裂，破裂。先用10%NaOH擦洗，用自来水管擦拭，后面用纯净水、异丙醇擦拭，干燥应急。磨砂玻璃柱子：同时先观察动物看看柱子有没有脏污，破裂。用铬酸洗钝化液泡过难以清理，纯净水洗冲，再换超纯水、二甲苯清扫冲洗，干燥后备力量用。

2. 采用过的补充液相色谱柱的清理

慢慢敲击倒出里面的固定相填料，用空气吹一下。先用溶解固定液的有机溶剂浸泡清洗，随后可以参照新柱的清洗方法。

二、稳固液涂渍

对于多空高分子多孔微珠，吸附性，多孔硅胶等，例如，GDX-x，Porapak, 分子筛等，无固定液，直接填充就行。

这对于担体（媒体）上涂渍放置液的放置相制作有以下几点。

1.估计所需要填充固定相的体积用量（担体用量）

例如2m x 2mm ID的填充柱，担体用量为

V(ml)=（ID/2）*(ID/2)*π*L*1.05=0.1*.0.1*3.14*200*1.05=6.6ml注：V----担体球体积或补充量（ml），ID----柱內径(cm)，ID/2----半经，π----圆弧率，柱长（cm）,1.05----多5%的保险服务担体留量。

2.稳定液的涂渍（静止涂渍法）

例如，用上述柱子制备10%邻苯二酸二壬酯（DNP）固定液的Chromosorb W担体的固定相：

用药量筒量取6.6ml的二次吹干好的Chromosorb W担体，在天坪上边称样的（比如说10g，这个是阐述，自然数更加方便核算，现实的基本操作以现实的称样准确）。而后在100ml烧杯杯，称取10%*10g=1gDNP，填加8-10ml（比6.6ml要大，确定并能低过所要担体中）甲苯（有机溶剂考虑统一液的阐述书）溶解度，将10 gChromosorb W HP质粒逐渐倾入，使质粒完全性浸入。

将烧杯置于通风柜中，自然干燥或在红外灯下干燥，并不断搅拌至溶剂挥发干，然后移至80℃烘箱中干燥4h,备用(烘箱温度取决于固定液的性质，例如OV-101固定液在110度烘烤)。

往上是静态变量涂渍法子，有着有着机械泵涂渍法（略）。

三、充实气相色谱柱的充实

一般采用真空泵抽气法。在填充柱的出口（接检测器一端）塞一些玻璃棉，用合适内径的软管（套紧柱子出口和真空泵）接到真空泵上，注意不要漏气。用一小漏斗接色谱柱的（进）口（接汽化室一端），开启真空泵，分次把制备好的色谱固定相填充物从漏斗填入柱内，同时不断轻敲柱壁，使其填充得均匀紧密。直至填料无法进入，头上留一点空隙塞上玻璃棉即可。标记好柱子的进口和出口。

图2. 液相色谱柱填装示幼儿小班教案图

四、插入液相色谱柱的退化

将色谱柱进口与进样口相连，出口端先不接检测器，以10-15mL/min流量通入载气(N2)。在高于柱子实际使用的最高温度10-20度，但必须低于柱子固定相的最高使用温度10-20度的条件下老化12-24 小时。然后连接检测器观察基线是否平直。

五、气相色谱柱的包存

做好标记，例如，固定液信息，载体，固定相配比，日期，用途等。密封色谱柱的两端。

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