Sulfo CY3-DBCO，CAS:1782950-79-1制备成空心微针递送合成mRNA的文献分享

Sulfo CY3-DBCO（磺酸性反应CY3-DBCO）Sulfo CY3-DBCO 就是一种水无水磷酸氢荧光纺织染料，用来铜亚铁离子轻松自由的点开检查是否现象。它运用了Sulfo-CY3（磺酸性不良生理反应Cyanine 3，刺激可见光主波长550 nm，释放可见光主波长570 nm）与DBCO（双环辛炔）功效团，后一个可与叠氮类物通过快、特女性朋友的 SPAAC 现象（应变速率带动的叠氮-炔点开现象）。由其磺酸基团增进了水无水磷酸氢，Sulfo CY3-DBCO 如此可运用在来在水溶性管理体制中标公示记淀粉酶、抗原、核酸和多糖元叠氮修饰物。它在细胞系标上、活体影像、海洋海洋生物共轭等探讨中体现了广泛的运用，特别是在適合于不能不离子液体剂的海洋海洋生物管理体制中。

一、基本信息

名称：Sulfo-CY3-DBCO

中文名称：磺酸化CY3-DBCO荧光探针

CAS:1782950-79-1

分子量：889

性状：红色粉末

结构：

 

应用：

1、组织记号和影像：将Sulfo-CY3 DBCO与含叠氮官能团的怪物大团伙共价偶联，其次于组织影像实验英文，数据可视化特定的怪物大团伙的地点和分布区。2、高蛋清酶酶质-高蛋清酶酶质完美影响科学调查：Sulfo-CY3 DBCO适用于符号高蛋清酶酶质，以科学调查高蛋清酶酶质-高蛋清酶酶质完美影响和表现环路。3、怪物学调节器：分离纯化原子探头和怪物学调节器器，使用在检查怪物学样表中对应怪物学原子的普遍存在和氨水浓度发展。

文献：

文章来源：

//www.cell.com/molecular-therapy-family/nucleic-acids/fulltext/S2162-2531(18)30035-0

文章来源：

//www.cell.com/molecular-therapy-family/nucleic-acids/fulltext/S2162-2531(18)30035-0

作者：

Sonia Golombek ∙ Martin Pilz ∙ Heidrun Steinle ∙ Efrat Kochba ∙ Yotam Levin ∙ Dominique Lunter ∙ Christian Schlensak ∙ Hans Peter Wende ∙ Meltem Avci-Adali

摘要：

近几余载来，研究方案背景生成mRNA在神经上皮癌癌癌细胞中生育所必须 外源淀粉酶的运用越变越极为极为重要。显然，生成mRNA的身上递送也许会从而引致非特异形摄入到不必须 的神经上皮癌癌癌细胞或人人体脏中，进而未能靶点疗法所必须 的神经上皮癌癌癌细胞。以至于，生成mRNA的部位和靶点疗法递送就停靠所必须 的神经上皮癌癌癌细胞类型的和公司变得越变越越变越极为极为重要。在某项研究方案中，鉴定了适用研究方案背景中空夹胶玻璃微针滴注的的办法去生成mRNA皮内递送。还有，构建了离体猪皮模形，以分享皮内给药后新肌肤中生成的mRNA介导的淀粉酶质表达方式出来。适用该模形，说明了生成mRNA的效率高递送，这会从而引致查测到由少量滴注的生成mRNA商品编号的高关卡可分秘的人源化Gaussia萤光素酶（hGLuc）淀粉酶。幽默的是，在不会转染化学试剂的的情况下滴注的生成信使核糖核酸依然够进神经上皮癌癌癌细胞并会从而引致淀粉酶质表达方式出来。在開始人体实验报告刚刚，构建的离体猪皮模形可以用于鉴定皮内递送生成mRNAs后所必须 淀粉酶质的成就 生育。还有，微针的适用使生成mRNAs可团结、无痛、效率高地运输到头层牛皮中；以至于，该的办法可以用于差异新肌肤病的部位疗法及及预苗育苗和免疫性疗法。 

方法：

合成hGLuc mRNA的Cy3标记

借助无Cu（I）（DBCO）点选化学物质对自动合成图片mRNA展开Cy3记号。1，在IVT前一天将5-叠氮基-C3-UTP添加自动合成图片mRNA中，那么借助与DBCO-Sulfo-Cy3孵育将Cy3与5-叠氮基-C3-UTPs搭配。所以说，在IVT前一天，实用1.9 mM 5-叠氮基-C3-UTP（芬兰耶拿市耶拿怪物物理学装修公司）和5.6 mM伪UTP带换7.5 mM假UTP。结合研制商的说明怎么写，实用RNeasy MinElute自净化水学制剂盒（QIAGEN）纯化IVT反映混物。那么，在37°C下，将5-叠氮-C3-UTP修饰语的mRNA与需求量为5倍摩尔否则的DBCO-Sulfo-Cy3（Jena Bioscience）一切孵育1小时候，用无核酸酶的水调高。实用数据报告表算DBCO-Sulfoo-Cy3的摩尔量与叠氮记号的mRNA的量的干系。实用RNeasy MinElute自净化水学制剂盒（QIAGEN）二次纯化反映混物，借助1%琼脂糖抑菌凝胶电泳跟在制冷（RT）食用1×GelRed在三硼酸EDTA（TBE）中印染15分钟的英文来证实mRNA的含量。实用光度计检测法有机废气浓度，并将mRNA存储在-80°C下。 

结论：

Synthesis of hGLuc-Encoding mRNA and Labeling with Cy3

hGLuc编码mRNA的合成及Cy3标记

再者，要为也能在皮内递送后论文测试炼制的 mRNA，运行无 Cu(I) 的叠氮化物-二苄基环辛炔 (DBCO) 点开电学将 hGLuc mRNA 标上为 Cy3，进来 Cy3 大团伙在IVT后与炼制 mRNA 中加入适量的 5-叠氮基-C 3 -尿苷三磷酸 (UTP) 联系。在图 1 B 中，运行红外光谱散射仪行明显度地看得见 Cy3 标上的 mRNA 带。在约 900 个碱基长宽高处论文测试到*强的荧光电磁波。因此，还行看得见还有就是两位在 1.5 和 2 kb 处的弱带。存在各个 Cy3 标上带的病因可能会是联系的 Cy3 大团伙的數量。每隔 mRNA 的 Cy3 大团伙數量就越多，大团伙量就越大。未加Cy3标上的mRNA经GelRed固色后可明显度论文测试到，且与标准*高的Cy3标上的hGLuc mRNA始终处于同一个层面。

 

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