CY7-SA 荧光标记链霉亲和素偶联物 Cy7-Streptavidin Conjugate的制备方法
CY7-SA(链霉亲和素)偶联物制备方法
中文名称:CY7标记链霉亲和素
英文名称:Cy7-Streptavidin Conjugate
别名:Cy7-SA偶联物、近红外染料标记链霉亲和素、赛妥染料标记链霉亲和素
供应商:西安pg电子娱乐游戏app 生物科技有限公司
用途:科研
一、原料与基本原理:
链霉亲和素(Streptavidin, SA):一种四聚体蛋白,具有很强的与生物素结合能力,是常用的生物素化检测系统核心分子;
Cy7-NHS(活性酯型近红外荧光染料):N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)酯形式的Cy7能高效与蛋白质中的赖氨酸残基反应,形成稳定的酰胺键;
缓冲液:如PBS(pH 7.4)或0.1M碳酸盐缓冲液(pH 8.3)可提供稳定环境。
二、合成步骤:
材料准备
将SA球蛋白溶解于PBS减慢液中,氨水浓度一半的控制在1–2 mg/mL; Cy7-NHS纺织染料往往以DMSO为溶液融掉,渗透压约为1–10 mM预留。共轭反应
坚持按摩尔比约1:5~1:10(SA : Cy7-NHS)速度慢将有机染料水悬浊液滴入至血清水悬浊液中; 化学表现制度在遮光因素下,于制冷孵育0.5–2时间,轻轻地搅伴提高网站化学表现;为严防非特女性朋友不起作用,pH稳定在7.5–8.5,预防炎热或极端分子pH。纯化处理
表现开始和结束后,利用透析袋(10 kDa)透析洗去未根据活性染料; 或安全使用疑胶过滤清洁层析(如Sephadex G-25)确定纯化,采集而来荧光峰使用的血清酚类化合物。质量控制与储存
检测法核蛋白氧化还原电位(280 nm)和荧光汲取峰(Cy7:约750 nm)验证偶联质量; 从而生成物阴凉分开包装于pH 7.4 PBS中,-20°C阴凉存有。
三、应用与优势:
应用:常用于近红外荧光成像、生物素标记分子检测、免疫组化、电泳显色、蛋白质追踪和体内荧光成像等;
优势:
导弹发射光的波长约775 nm,结构穿透性力强;与生物制品素高亲和融合,特异形强;可与荧光素、Cy3等染色剂打配用在多种查测。
关于我们:
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