巯基-透明质酸（HA-SH, MW: 70K）

巯基化全通透质酸酶（Hyaluronic Acid Thiol, HA-SH）是将天然冰全通透质酸酶（分子式量70,000 Da）获取巯基（-SH）突显的是一种能力化多糖，用在构筑可热塑水妇科凝胶、靶向药物载药模式或生物体资料突显。

合成方法：
巯基化主要通过羧基活化与巯基小分子的接枝反应实现。以下是常见的合成步骤：

原料准备：

合理质酸钠盐（MW ≈ 70 kDa）；巯基产生免疫试剂：半胱胺硫酸盐、2-巯基乙胺、L-半胱氨酸等；滋养剂：EDC（1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺）和 NHS（N-羟基蜜腊酰亚胺）。

活化反应：
将HA溶于MES缓冲液（pH 5.5），加入EDC/NHS活化羧基，使其形成活性酯。

巯基引入：
加入巯基引入试剂（如半胱胺），在pH 6~7条件下缓慢搅拌反应12–24小时。反应过程中应避免氧化，可在氮气下进行。

纯化与冻干：
通过透析袋（分子截留约10kDa）进行除杂，冷冻干燥得到HA-SH产物。

注意事项：

巯基易于氧化反应，应防止水汽接触性；能加入DTT等还原系统剂稳固巯基；巯基分子量可实现Ellman’s法定性量测量。

应用方向：
广泛用于构建还原敏感水凝胶、金属纳米粒子包覆、多肽偶联载体、生物传感器等。

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