荧光标记氨基酸定制技术-西安pg电子娱乐游戏app
生物
荧光标记氨基酸定制技术
一、概述
氨基酸的荧光标记广泛应用于蛋白质动态追踪、代谢示踪、酶活分析、信号路径研究等。通过对天然氨基酸或其衍生物进行荧光修饰,可构建荧光探针、标记底物或模拟肽链。
二、定制技术流程
1. 核苷酸前体会选择天然植物氨基酸等如:Lys(有–NH₂)、Cys(有–SH)、Asp/Glu(有–COOH)随之出现化碳水化合物(Fmoc-AAs、Boc-AAs等)2. 荧光染色剂与连接方式方式FITC → 表现Lys上的–NH₂NHS-Rhodamine/Cy5 → 胺基偶联Maleimide类荧光染剂 → 与Cys-SH影响EDC/NHS法 → 适用于氨基与羧基两者的偶联3. 不良反应條件水或DMF管理体制生理反应pH保持在 7.4–8.5 彼此反映时:1~12H,遮光4. 纯化与了解纯化的方式:透析、HPLC、层析定量分析方式方法:MALDI-TOF、荧光光谱图、NMR、MS三、应用
荧光氨基酸等在身体里分解示踪荧光蛋白质突显多肽倡导FRET探头核营养物质定向委培表达或几丁质酶监测四、推荐试剂
| 采血管 | 用途 |
| FITC、NHS-Cy5 | 核心荧光标注物 |
| L-Lysine、Cys、Fmoc-Lys(Boc)-OH | 常见核苷酸底物 |
| DMF、HEPES | 石油醚标准 |
| EDC、NHS | 酰胺键催化的作用剂 |

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