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核酸的荧光修饰定制技术
荧光修饰语核酸(如siRNA、miRNA、ASO、CRISPR gRNA、电极DNA)诸多使用細胞跟踪、核酸转染热效率评估方法、FISH电极构筑、qPCR监测、靶向药物递送摄像头监控等方向。1. 常用荧光基团与修饰位点
荧光基团 | 绘制定位 | app描述 |
FAM (6-Carboxyfluorescein) | 5’端部 / 的内部 | 实用,深绿色检修通道 |
TAMRA / ROX | 3’端 | 经常使用于PCR电极 |
Alexa Fluor系统 | 随便位点 | 高稳定可靠性与亮度调节 |
BHQ / Dabcyl(淬灭基团) | 与荧光对相互配合 | 适用于FRET检测器、qPCR |
2. 修饰方式
a. 5'/3'未端淡化经过磷酰胺生物制成添加荧光基团;普遍,保持稳定性强,不作用碱基搭配。b. 核酸室内掩盖在碱基或核糖位子插入图装饰位点;不适应用在高分辩检测器的设计。c. 双标/FRET测试探针5’端荧光 + 3’端淬灭,警报随联系/分解影响;运用于实时公交PCR、酶切查测等。3. 特殊设计技术
荧光符号+修饰语核酸(如2'-OMe、LNA)搭档:提升相对稳定义与微生物活力性;核酸适用体+荧光:采用肺部肿瘤靶向疗法;微米的结构(如DNA origami)+荧光:数十位点标记符号用作FRET或构象科学研究;4. 应用方向
受损细胞转染示踪(FAM-siRNA);活体监视显像(Cy5-miRNA);FRET或qPCR检测器来设计;核酸肿瘤药物休内分布区追踪;核酸-肽/膜蛋白分手后复合物降钙素原检测监视。观于企业:
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