KLH 偶联多肽定制技术(Keyhole Limpet Hemocyanin–Peptide Conjugation)
KLH 偶联多肽定制技术(Keyhole Limpet Hemocyanin–Peptide Conjugation)
1. 技术概述
KLH(钥孔鲍血蓝蛋白,Keyhole Limpet Hemocyanin)是一种高分子量、免疫原性很强的载体蛋白,广泛用于疫苗开发、抗体制备和免疫原增强研究中。由于其非哺乳动物来源、结构复杂、强大的免疫佐剂效果,KLH 被常用于与小分子多肽偶联形成高免疫原复合物,从而诱导体内强烈的免疫反应。
2. KLH 的类型
分类的KLH企业产品分为两者的方式:原生态KLH(native KLH):大氧分子缩聚体,可以充当役苗或免疫力佐剂。脱离KLH(subunit KLH):聚合物行驶,碳原子量较低,更紧定,适合于科学化学实验偶联生理反应。3. 多肽-KLH 偶联原理
KLH使用价值具有刺激性过多赖氨酸残基(-NH₂),那么可采用如下所示类型化学式习惯与多肽偶联:A. EDC/NHS酰胺键偶联具体条件:多肽有羧基,KLH含带氨基工艺技术:EDC滋养羧基 → NHS平衡里边体 → 与KLH体现进行酰胺键B. 戊二醛交连前提:多肽和KLH都带氨基差向异构:构成 Schiff 碱构成,接着备份稳定性C. 马来酰亚胺/巯基桥接的条件:多肽含带半胱氨酸(-SH)加工制作工艺 :先将KLH经由马来酰化整理,再与多肽巯基偶联D. 单击电化学偶联情况:多肽修饰语叠氮或炔基,KLH联网对端官能团优点和缺点:效应高率、低副反馈,合适高精密度较定位偶联4. 定制流程
多肽回文序列聚合:可获取PC版或N端巯基、羧基、链接桥臂(如PEG)选购偶联途径:跟据构成和的主要用途敲定EDC/NHS、戊二醛或点击量药剂学偶联表现具体条件调优:缓存数据液:MES、PBS、Borate等室温:恒温的或4°C比例表:一样多肽:KLH = 10:1~100:1纯化与验正:透析、离心分离吸附清理分离多肽SDS-PAGE、电泳验证偶联顺利蛋白酶浓硫酸浓度的检测与偶联的效率分折5. 应用方向
光催化原理抗多肽抵抗能力(较为常用作抗原)恶性肿瘤狂犬疫苗、抗体阳性药品前体自身的免疫检测病模特分析佐剂资料预苗开发设计(如HPV、淋巴肿瘤肽预苗)产地:西安pg电子娱乐游戏app 生物
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