荧光标记葡聚糖(AF染料-Dextran)定制技术
荧光标记葡聚糖(AF染料-Dextran)定制技术
一、技术概述
葡聚糖(Dextran)是一种天然葡萄糖多糖,结构柔顺,生物相容性好,常用作分子探针载体、血容量膨胀剂、药物修饰载体等。通过与Alexa Fluor(AF)系列荧光染料结合,可实现高稳定性、低自荧光、高亮度的葡聚糖荧光标记。
二、标记原理
葡聚糖主链含丰富羟基基团,但羟基与大部分染剂不温顺,这样大部分先将其被氧化制成醛基,再与染剂的反应,或运用预碱化的AF羧酸/NHS酯开展接枝。三、常用标记方法
方法步骤一:钠高碘酸(NaIO₄)防氧化 + 邻苯二胺完美重现法葡聚糖在泥里加如NaIO₄,常温状态发应2 h,自动生成醛基;填加 AF-NH₂(如AF488-NH₂、AF647-NH₂);融入NaBH₃CN修复醛胺,出现平稳共价对接;透析出掉游离态活性染料。工艺二:AF-NHS 酯间接标签氨基化葡聚糖若要预先将葡聚糖氨基化(Dextran-NH₂),可就直接与 AF-NHS 酯表现:缓冲区液:pH 8.3 NaHCO₃;温湿度:高温,阴凉不良反应 2–4 h;普遍染剂:AF488-NHS, AF594-NHS, AF647-NHS。四、纯化与表征
透析或柱层析删去游走纺织染料;UV-Vis、荧光光谱分析探测标志率;GPC-HPLC检则大分子量遍布;保持稳定可靠性处理自测:37°C、血清中24 h无漂移。五、应用领域
碳原子示踪与三维成像(微动脉血管渗性);nm质粒呈现与光热推进诊疗;免役学与女性解剖学中搜寻大原子核蔓延。产地:西安pg电子娱乐游戏app 生物
用途:科研
以上资料由pg电子娱乐游戏app 生物小编zhn提供,仅用于科研
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