荧光标记多肽底物定制技术-西安pg电子娱乐游戏app
生物
荧光标记多肽底物定制技术
一、概述
荧光标记多肽底物是一类在蛋白酶活性检测、信号通路分析、细胞成像等方面应用广泛的功能化分子探针。通过在多肽链N端或C端共价连接荧光团,可用于FRET探针、酶切底物、细胞摄取评价等。
二、定制技术路线
1. 多肽炼制(固相炼制法)选用Fmoc固相结合攻略 :食用氨基硅胶粘合剂承载结合最终目标回文序列;操纵链长(5~30个有机酸残基);高饱和度(>95%)借助HPLC纯化;特喜欢的人酶切位点设汁(如DEVD、RRR等)。2. 荧光绘制选用荧光染剂:FITC(异硫氰酸荧光素)Cy3/Cy5、FAM、TAMRA、Alexa Fluor 系列作品可的设计为FRET对(如FAM-TAMRA)掩盖位点使用:N端氨基一直标出;C互联网顺利通过外链臂机遇;其中加盟接触臂或挥发位点(PEG linker、酶切位点)3. 金属接头制定与双箭头技術选择Lys侧链氨基或Cys巯基产生荧光标示;可创造出一个酶反映型FRET结构的,广泛用于荧光电开关探头;接连肽段与多肽探头之前依据PEG链被动式接连。三、定制参数与服务内容
业务 | 原因分析 |
多肽间距 | 5–30 aa |
荧光染剂 | FITC, TAMRA, Cy5, Alexa Fluor 等 |
装饰位点 | N端、电脑端、Lys侧链等 |
酶为了响应性 | 可定制为MMP、Caspase、Trypsin等甄别底物 |
饱和度规则 | >95%,MS鉴定会/HPLC计划书 |
交给类型 | 冻干粉/水稀硫酸,带完成说明怎么写书 |
四、应用方向
荧光激光散斑检测器:应用于内部摄食或市场定位科学研究;酶抗逆性酶类查重:如Caspase-3、MMP抗逆性酶类估评;FRET电极:广泛用于血清沟通互动分析;移动信号转导途径实验:用作底物建立机器。有关系推送:
FITC标注蛋清激酶(即蛋清激酶A(protein kinase A,PKA)FITC标志酪氨酸/苏氨酸血清激酶(RACα-serine/threonine protein kinase,Akt1))N6-甲基腺嘌呤的荧光标上FITC标志的卵清淀粉酶(FITC-OVA)黑色荧光标注 Dil-Ac-LDL 固色FITC-WGA 深绿荧光标签麦胚凝集素 单糖检侧硒血清O(Sel O)的荧光标志物人绒毛膜膜促性腺激素类(hCG)的荧光标记符号 FITC-hCG FITC-Gelonin,荧光标志何首乌FITC/RhB@SilMA 生物工程胺崩溃型水凝露微针贴片