荧光标记的甘露聚糖技术简介（Fluorescently Labeled Mannan）

一、基本概述

杨枝聚糖（Mannan）有的是类來起源于酵母粉、作物或革兰氏阴性菌血内部壁的绿色多糖，其主要由杨枝糖单元尺寸以α-(1→6)为中心链，添加α-(1→2)、α-(1→3)结点键进行连接组成的。是由于其设备构造与许多种抗体力有关系蛋白激酶（如巨噬血内部杨枝糖蛋白激酶、树突血内部蛋白激酶DC-SIGN）极度亲和，杨枝聚糖可用于靶向治疗递送、役苗佐剂、抗体力调节器等各方面。当珠露聚糖被荧光有机染料记号后（荧光珠露聚糖，Fluorescent Mannan），并不是留存其靶向治疗工作，还应有可视化数据水平，可以选择于神经细胞摄食三维成像、里面分布图制作分析、免疫力递送示踪等，不是种主要的多工作天然水涨原子材质 

二、荧光标记方法

（1）甘露聚糖的功能修饰

致使具有杨枝聚糖存在有明显的反馈性基团，前须加入反馈基团如氨基或羧基。经常用的下一阶段呈现办法包含：珠露聚糖氨基化（Mannan-NH₂）：依据与环氧树脂丙烷胺等反應形成伯胺；珠露聚糖羧基化（Mannan-COOH）：依据被氧化或接枝聚谷氨酸转化羧基。

（2）荧光染料连接方式

荧光活性染料以分成可与氨基响应的NHS酯类，与巯基响应的马来酰亚胺类，或能够 点击进入电化学对接的叠氮/炔基构造。通常对接方式方法内容如下：

体现方式	荧光有机染料构成	表现体系
NHS酯类	FITC-NHS，AF488-NHS	与氨基达成酰胺键
马来酰亚胺类	Cy5-MAL, Cy7-MAL	与巯基变成硫醚键
炔基-叠氮	DBCO-Cy5、Cy7-N₃	Click反映（铜或无铜点一下）

（3）荧光标记示意流程

将Mannan溶解性于PBS或碳酸响应液中；相对比较缓慢滴入荧光有机染料-NHS或Cy5-MAL，调控pH在7.5~8.5；发应1–2一小时后透析我们要除自由染剂；化合物冷藏晾干或上传在背光要求下。

 

三、常用荧光染料

活性染料称呼	发射卫星激发光谱	实用加测	反映
FITC（异硫氰酸荧光素）	520 nm	脉冲光共焦点、普鲁士蓝染色上皮细胞术	较常用于深绿标签，的成本可控
Alexa Fluor 488	520 nm	遮暇稳固性，较FITC强
Cy3/Cy5	570/670 nm	神经元显像、共聚焦点	强烈的紫色/远紫色荧光
Cy7、ICG	780–800 nm	活体近红外影像	组织机构穿透力强，实适用体內示踪
pHrodo	pH刺激性活性染料	呈酸性区域环境荧光增进	比较合适溶酶体监视

 

四、技术优势

靶向治疗免疫体组织细胞系体组织细胞系：杨枝聚糖可被树突体组织细胞系、巨噬体组织细胞系等毁灭，荧光标识也可以于追查其摄入热效率。生物体混溶性好：自然來源，低免役致毒，时候应用在各种动物實驗与活体研究方案。适应用于于多公司：可绘制脂质体、奈米粒、蛋白质、核酸等多样媒体，确保实用功能化递送。一酶联免疫法力强：荧光硬度与聚糖量对应，可一酶联免疫法数据分析摄食与地域分布。苹果支持多个三维显像产品：苹果支持流式受损细胞术受损细胞术、共瞄准、活体三维显像系统化（IVIS）等。 

五、应用方向

（1）免疫检测人体细胞靶点递送研究分析杨枝聚糖能结合实际CD206感觉（杨枝糖感觉），靶点巨噬細胞、DC細胞；荧光标出后可跟踪地位递送历程，测评胞吞转化率、胞内地位（如溶酶体共地位）。（2）防疫针佐剂与抗原递送整体荧光杨枝聚糖可表达脂质体、PLGA等递送平台，将抗原淀粉酶共载；信息可视化役苗打开APC（抗原呈递组织细胞）的新动态操作过程。（3）活体区域及示踪显像NIR有机染料（如Cy7、ICG）标记图片珠露聚糖适用于小鼠身体内荧光影像，研究分析聚糖在肿癌、淋巴腺结、脾脏等的积累情况下；不适采用细菌感染地方示踪。（4）聚糖快速精确制度分析利用不一节构珠露聚糖荧光测试探针，蜡烛燃烧实验与CLRs（C型凝集素感觉）等糖面部识别感觉的紧密联系考核机制；可铺助选择靶向药物配体架构提升。

六、相关试剂推荐

类产产品品牌称	阐述介绍
FITC-Mannan	FITC符号的甘霖聚糖，可使用于细胞膜影像、免疫细胞监视
Cy5-Mannan	远红记号杨枝聚糖，合适表层结构激光散斑
Mannan-NH₂	氨基化甘霖聚糖，供之后标注操作
Mannan-DBCO	炔基珠露聚糖，用来点击进入化学上的荧光标注
DSPE-PEG-Mannan	脂质突显珠露聚糖，都可以于脂质躯干部面突显
ICG-Mannan	近红外记号甘霖聚糖，最合适IVIS小宠物三维成像

七、储存与使用注意事项

荧光标上杨枝聚糖应背光存为（4°C或−20°C），以避免光固色；实用前多方面分解，推建高沸点溶剂：PBS、H2O或DMSO兑水；荧光信息查测需输入增强与射可见光波长；荧光标示后应检查标示使用率（吸光度法、HPLC或荧光光谱图分折）；若用做身体内部实验室，选择用无害纺织有机染料（如ICG、Cy7）且展开纯化消除氧化钙含量纺织有机染料。