荧光标记的甘露聚糖技术简介（Fluorescently Labeled Mannan）

一、基本概述

杨枝聚糖（Mannan）是一种类特征于发酵粉、花草或大肠杆菌体组织内部壁的天然水多糖，主要是由杨枝糖单无以α-(1→6)相结合链，兼施α-(1→2)、α-(1→3)层次架构键无线连接形成。会因为其架构与几种抗体涉及到多巴胺肾上腺素多巴胺受体（如巨噬体组织内部杨枝糖多巴胺肾上腺素多巴胺受体、树突体组织内部多巴胺肾上腺素多巴胺受体DC-SIGN）高强度亲和，杨枝聚糖适用于靶向疗法递送、肺炎疫苗佐剂、抗体调等各方面。当珠露聚糖被荧光染色剂图标后（荧光珠露聚糖，Fluorescent Mannan），不禁永久保存其靶点性能模块，还具有交互力，能作于上皮细胞摄入成相、体里区域研究探讨、免疫检测递送示踪等，也是种最重要的多性能模块当然抓氧分子材质 

二、荧光标记方法

（1）甘露聚糖的功能修饰

考虑到本身甘霖聚糖短缺有效的影响性基团，首先需要引出影响基团如氨基或羧基。使用的品牌的校园营销推广活动在初期装饰原则其中包括：甘霖聚糖氨基化（Mannan-NH₂）：经过与丙稀酸丙烷胺等化学反应引出伯胺；甘霖聚糖羧基化（Mannan-COOH）：可以通过硫化或接枝聚谷氨酸引出羧基。

（2）荧光染料连接方式

荧光纺织染料分可与氨基表现的NHS酯类，与巯基表现的马来酰亚胺类，或在超链接生物链接的叠氮/炔基空间结构。比较常见链接行为以下的：

表达型号	荧光颜料框架	发生反应规则
NHS酯类	FITC-NHS，AF488-NHS	与氨基达成酰胺键
马来酰亚胺类	Cy5-MAL, Cy7-MAL	与巯基产生硫醚键
炔基-叠氮	DBCO-Cy5、Cy7-N₃	Click不起作用（铜或无铜双击）

（3）荧光标记示意流程

将Mannan容解于PBS或碳酸缓解液中；较慢加入适量荧光纺织染料-NHS或Cy5-MAL，抑制pH在7.5~8.5；反馈1–2小時后透析我们要除游离于颜料；产品冷冻熟食干澡或保存文档在背光條件下。

 

三、常用荧光染料

活性染料明称	使用主波长	适于探测	代表
FITC（异硫氰酸荧光素）	520 nm	皮秒激光共自动对焦、流式肿瘤细胞肿瘤细胞术	可用于环保标示，成本价低
Alexa Fluor 488	520 nm	高光粉比较热稳定性分析，较FITC强
Cy3/Cy5	570/670 nm	神经细胞影像、共对焦	分明的紫色/远紫色荧光
Cy7、ICG	780–800 nm	活体近红外激光散斑	安排击穿强，选在胃中示踪
pHrodo	pH太敏感染色剂	强酸生态环境荧光增加	最适合溶酶体定位跟踪

 

四、技术优势

靶向疗法免疫抗体组织：杨枝聚糖可被树突组织、巨噬组织等变异，荧光符号要用于追查其摄取量率。菌物相匹配性好：非人工种类，低免疫性致毒，合适采用部分动物测试与活体深入分析。于于多的平台：可体现脂质体、纳米技术粒、蛋白质、核酸等好几种质粒载体，保持能力化递送。参考值性能强：荧光抗拉强度与聚糖量相应的，可参考值阐述摄入与分布点。适应多种多样显像设施：可以支持流式受损细胞术受损细胞术、共自动对焦、活体显像体系（IVIS）等。 

五、应用方向

（1）抗体细胞膜靶点递送钻研甘霖聚糖能联系CD206感觉（甘霖糖感觉），靶点巨噬細胞膜、DC細胞膜；荧光标上后可手机产品定位跟踪递送期间，评估报告胞吞能力、胞内手机产品定位（如溶酶体共手机产品定位）。（2）预防针佐剂与抗原递送程序荧光珠露聚糖可表达脂质体、PLGA等递送机系统，将抗原淀粉酶共载；信息可视化接种疫苗走进APC（抗原呈递细胞核）的的动态过程中。（3）活体规划及示踪激光散斑NIR活性染料（如Cy7、ICG）标出杨枝聚糖要用于小鼠内部荧光三维成像，调查聚糖在肿癌、淋巴腺结、脾脏等的累积状态；不适应用在真菌感染的位置示踪。（4）聚糖掌握原则论述使用多种格局杨枝聚糖荧光电极，探讨与CLRs（C型凝集素肾上腺素多巴胺受体）等糖鉴别肾上腺素多巴胺受体的依照措施；可辅助制作淘汰靶点配体结构设计整合。

六、相关试剂推荐

企业产产品名字大全	简短说明书
FITC-Mannan	FITC标签的杨枝聚糖，符合于细胞核激光散斑、抗体监视
Cy5-Mannan	远网红图标杨枝聚糖，适当表层结构激光散斑
Mannan-NH₂	氨基化珠露聚糖，供后期的标记图片选择
Mannan-DBCO	炔基甘霖聚糖，使用在点击量耐腐蚀荧光符号
DSPE-PEG-Mannan	脂质掩盖甘霖聚糖，常用于脂质躯干面掩盖
ICG-Mannan	近红外标上杨枝聚糖，是和IVIS小猎物成相

七、储存与使用注意事项

荧光标注杨枝聚糖应闭光同步保存（4°C或−20°C），防范光固色；选用前更加充分溶解性，推建相转移催化剂：PBS、H2O或DMSO就稀释；荧光数字信号判断需适配发挥与发射卫星光波波长；荧光标识后应判断标识热效率（吸光度法、HPLC或荧光光谱仪讲解）；若中用里面实验室，比较适合用无磷纺织活性染料（如ICG、Cy7）且完成纯化出掉自由纺织活性染料。