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荧光标记修饰细胞膜囊泡技术(如外泌体)定制技术
发布时间:2025-07-15     作者:zhn   分享到:

荧光标记修饰细胞膜囊泡技术(如外泌体)定制技术

1. 技术概述

细胞膜囊泡(如外泌体Exosome、微泡Microvesicles、膜纳米囊泡Nanovesicles)是天然来源的纳米载体,参与细胞间通信和药物递送。通过荧光标记这些囊泡,可实现体内外成像、分布追踪、摄取研究等目的。

2. 荧光染料类型与选择

膜荧光染剂:DiI(红)、DiO(绿)、DiD(远红)、DiR(近红外)等。亲脂性荧光素:PKH26、PKH67 等,内嵌脂两层。荧光蛋清融入图标:如CD63-GFP/CD9-RFP,应用在隔代遗传遮盖的细胞核。量子点标示:不稳高,可长远显像。

3. 标记方法与流程

办法一:膜染法(直接性掺染)

适用于DiI、DiO、PKH系列染料
步骤如下:

将纯化外泌体与活性染料上班液(PBS或做好稀释工作的Diluent)混。遮光孵育 5–30 一分钟。用超滤膜管或违章停车离心力去掉未融入颜料。用PBS重悬,实施定量分析和应用领域。做法二:结合蛋白酶法勾勒呈现荧光标志膜蛋白酶(如CD63-GFP)稳定的体细胞株。抽取其锻炼基生成外泌体,即才能得到内源性荧光囊泡。不需第二次图标,好动态化视频监控和长时间实验操作。步骤三:生态学素-亲和素法表皮绘制生物制品素后接荧光亲和素(如AF488-avidin),完善标记图片特情人。

4. 标记评价

粒级测量:DLS 或 NTA(nm颗料关注剖析)。荧光光谱分析:发挥/释放峰与标出吸收率判断。TEM/CLSM显像:安全验证荧光地段与形式开展性。

5. 应用示例

DiR-Exo体内的荧光激光散斑,了解外泌体在肝、肺、脑组识的遍布。PKH26外泌体用以癌肿靶点运输业可视化数据。GFP-外泌体雷达回波图追综巨噬人体细胞夺取行为表现。 

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产地:西安pg电子娱乐游戏app 生物

用途:科研


关于我们:

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