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荧光标记修饰细胞膜囊泡技术(如外泌体)定制技术
发布时间:2025-07-15     作者:zhn   分享到:

荧光标记修饰细胞膜囊泡技术(如外泌体)定制技术

1. 技术概述

细胞膜囊泡(如外泌体Exosome、微泡Microvesicles、膜纳米囊泡Nanovesicles)是天然来源的纳米载体,参与细胞间通信和药物递送。通过荧光标记这些囊泡,可实现体内外成像、分布追踪、摄取研究等目的。

2. 荧光染料类型与选择

膜荧光活性染料:DiI(红)、DiO(绿)、DiD(远红)、DiR(近红外)等。亲脂性荧光素:PKH26、PKH67 等,植入脂双层玻璃。荧光血清要融合标记符号:如CD63-GFP/CD9-RFP,使用遗传病淡化的生殖细胞。量子点符号:稳定的高朝,可常期三维成像。

3. 标记方法与流程

步骤一:膜染法(间接掺染)

适用于DiI、DiO、PKH系列染料
步骤如下:

将纯化外泌体与活性染料运行液(PBS或掺水的Diluent)混合物。阴凉孵育 5–30 几分钟。用反渗透装置管或限速离心分离弄掉未紧密结合纺织染料。用PBS重悬,通过定性分析和操作。做法二:整合蛋白质法创设展现荧光标注膜淀粉酶(如CD63-GFP)平衡组织株。分类整理其教育细胞培养液分离出来外泌体,即收获内源性荧光囊泡。不同2次标签,适用动态信息监控器和长时间测试。技巧三:生物技术素-亲和素法外壁体现菌物素后接荧光亲和素(如AF488-avidin),上升符号活性聊天。

4. 标记评价

孔径加测:DLS 或 NTA(微米颗粒物监测研究)。荧光光谱图:增强/导弹发射峰与标注使用率测定法。TEM/CLSM三维成像:验证通过荧光的位置与的结构抹去性。

5. 应用示例

DiR-Exo机体荧光成相,观察动物外泌体在肝、肺、脑策划 的数据分布。PKH26外泌体广泛用于肉瘤靶向疗法装卸搬运数据可视化。GFP-外泌体及时侦测巨噬体细胞释放犯罪行为。 

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产地:西安pg电子娱乐游戏app 生物

用途:科研


关于我们:

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