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FITC-Hemoglobin(绿色荧光素标记血红蛋白)定制合成技术
发布时间:2025-07-17     作者:zhn   分享到:

FITC-Hemoglobin(绿色荧光素标记血红蛋白)定制合成技术

技术概述

FITC(荧光素异硫氰酸酯)是一种广泛应用于蛋白质标记的绿色荧光染料,可与蛋白质中的**胺基(主要为赖氨酸残基)特异性共价结合。将FITC与血红蛋白(Hb)**偶联,不仅能实现Hb在体内的可视化追踪,也可用于氧输运研究、光热治疗载体标记、蛋白转运示踪等方向。

合成工艺流程

1. 材料准备

赤红蛋清(人源/牛源)FITC(溶水DMSO或碳酸盐缓冲区液)缓解液:0.1 M 碳酸氢钠缓解液,pH 9.0

2. FITC标记反应

将Hb溶解出来于碳酸盐抗震液中(1–10 mg/mL)。融入FITC悬浊液(摩尔比FITC:Hb ≈ 10:1),遮光反映4–12 h,摄氏度管理在4°C。发生反应具体步骤中即时搅拌器,必免淀粉酶奠定。

3. 分离纯化

采用Sephadex G-25凝胶的作用过滤清洁柱或反渗透膜(10 kDa膜)避开未融入的FITC。可根据透析进步骤彻底清除小原子核。

4. 标记效率评估

施用UV紫外线-可以看到光分光光度计探测280 nm(球蛋白)和495 nm(FITC)挥发。计算方式标记符号度:FITC/Hb摩尔比能令用荧光光谱仪(λ_ex=495 nm, λ_em=519 nm)确保荧光性能参数。

5. 储存条件

阴凉、4°C存有于PBS或HEPES中,尽量不要反复不断地冻融。

技术亮点

FITC标记图片继承Hb的结构和职能,采用来活体影像、神经元摄食钻研。技艺温文尔雅,适于大企业规模动物图标制作。可开拓为氧宣泄信息可视化研发电商平台。 

制造地:深圳pg电子娱乐游戏app 海洋生物

作用:科学研究

FITC-Hemoglobin


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