齐墩果酸（Oleanolic Acid, OA）的荧光标记技术

1. 荧光标记原理与策略

齐墩果酸分子含有羧基、烯烃结构，可通过“羧基–氨基”或“羧基–羟基”形成酯、酰胺键与荧光染料偶联。常用染料包括FITC（异硫氰酸荧光素）、Cy5、Cy5.5、Alexa Fluor 和 DyLight 系列。

a. FITC标记

化学工业思维模式：OA–OH（酯化）或OA–COOH（酰胺）与FITC异硫氰酸基生理反应，标上后荧光在刺激 ~490 nm，放射 ~520 nm。特别：费用低、平时体视显微镜普通，荧光抗拉强度比较适中，但光氯漂较突出 。

b. Cy5/Cy5.5标记

方案设计：采用Cy NHS酯与OA的羧基反映绘制Cy5-OA/Cy5.5-OA。胜机：近红外调动（≈650–700 nm）、反射（≈670–720 nm），背景图案低、穿透力深 。广泛应用典例：Cy5-OA采用小鼠原位癌肿成相，在癌肿身体部位荧光网络信号看不出少于肝，合适实时视频监控用药丰度 。

c. 其他染料

Alexa Fluor 647、DyLight 650/680 需用于多出入口显像。标示有高效率、光相对稳定义优；需按照检测设备适用充分调动源。

2. 实验流程与注意事项

镶嵌先决条件：OA与荧光NHS酯（Cy5、FITC等）在常温、干燥DMSO或DMF中，填加偏碱消泡剂（如TEA或DIPEA），高温2–4 h。纯化方法步骤：的反应后用矽胶柱或半制得HPLC纯化，查证单峰。

表征确认：

MS 或 HR-MS 询问大分子量变化；荧光光谱仪检查标注热效率；核磁核实要点官能团的运用（酰胺或酯键确立）。植物选用：生殖细胞膜/植物工作前提高认识祛除自由活性染料，并检侧生殖细胞膜毒副作用（MTT、CCK-8）。

3. 应用示例

肿瘤细胞膜三维成像：Cy5-OA可于共专注高倍显微镜关察肿瘤细胞膜内导航wifi定位，如共导航wifi定位线粒体、内质网或脂滴 。休内显像：采用小食草动物活体荧光显像仪，需用于开展药布置及日常积累。术中导行、肿癌的动态监测站具有着提升空间 。分泌共识机制实验：荧光抗拉强度变反映落实OA脱离、分泌情况发生。 

用途：仅应用于科研，不能用于人体实验！

以上资料由小编zhn提供，仅用于科研

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