齐墩果酸（Oleanolic Acid, OA）的荧光标记技术

1. 荧光标记原理与策略

齐墩果酸分子含有羧基、烯烃结构，可通过“羧基–氨基”或“羧基–羟基”形成酯、酰胺键与荧光染料偶联。常用染料包括FITC（异硫氰酸荧光素）、Cy5、Cy5.5、Alexa Fluor 和 DyLight 系列。

a. FITC标记

物理化学形式逻辑：OA–OH（酯化）或OA–COOH（酰胺）与FITC异硫氰酸基影响，标记图片后荧光在调动起 ~490 nm，射 ~520 nm。显著特点：制造费低、常規电子显微镜互通，荧光比强度较大，但光漂白剂较显著 。

b. Cy5/Cy5.5标记

工作方案：应用Cy NHS酯与OA的羧基体现转为Cy5-OA/Cy5.5-OA。竞争优势：近红外发挥（≈650–700 nm）、导弹（≈670–720 nm），经验低、透过深 。利用具体方法：Cy5-OA主要用于小鼠原位癌症影像，在癌症布位荧光的信号突出多于肝或其他排毒器官，适用于公交实时数据监测药物治疗丰度 。

c. 其他染料

Alexa Fluor 647、DyLight 650/680 可以选择于多通畅显像。产品标签有有效率、光稳确定性优；需据测试仪器支持鼓励源。

2. 实验流程与注意事项

人工先决条件：OA与荧光NHS酯（Cy5、FITC等）在干燥处理DMSO或DMF中，融入碱性食物改性剂（如TEA或DIPEA），空调温度2–4 h。纯化步奏：不起作用后用矽胶柱或半准备HPLC纯化，判定单峰。

表征确认：

MS 或 HR-MS 明确分子式量变化；荧光光谱仪检查测量图标错误率；核磁认定主要官能团的相结合（酰胺或酯键达成）。生物工程选用：受损组织/节肢动物科学实验前加强组织领导删去徘徊染色剂，并在线检测受损组织毒素（MTT、CCK-8）。

3. 应用示例

血肿瘤细胞激光散斑：Cy5-OA能够用于共集聚显微镜查看查看血肿瘤细胞内标记，如共标记线粒体、内质网或脂滴 。体内的影像：完成小甲壳动物活体荧光影像仪，能够用于考评药物治疗规划及掌握。术中导航一体机、恶性肿瘤技术性监测数据包括发展空间 。代谢率转化制度学习：荧光屈服强度变动造成OA放出、代谢率转化的情况。 

用途：仅应用于科研，不能用于人体实验！

以上资料由小编zhn提供，仅用于科研

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