FITC-CAQK(荧光素标记 CAQK 多肽)定制合成技术
FITC-CAQK(荧光素标记 CAQK 多肽)定制合成技术
1. 多肽与标记策略
CAQK(Cys-Ala-Gln-Lys)也是种对交感周围周围神经周围周围神经程序髓鞘脱髓鞘范围特男人密集的小肽,常用于周围周围神经挤压伤靶向药物药物递送(列如 ,多发病性固化、脊髓挤压伤模特)。将 FITC(异硫氰酸荧光素)标签在 CAQK 的 N 端或侧链 Lys 上,能达到一起掌握靶向药物药物(CAQK 辨识 ECM)与荧光跟踪功能键。2. 合成技术流程
肽段合出:主要采用 Fmoc 固相肽合出(SPPS),顺寻合出 Cys-Ala-Gln-Lys 的四肽,使用 Wang 硅胶粘合剂或 Rink 硅胶粘合剂有所作为承载;Spacer 读取图:为避开 FITC 标识后因位阻或酸促裂有 N-端*后一碳水化合物开裂,最好在终端 Lys 或 N-端读取图接连子(如 6-氨基己酸 Ahx);FITC 偶联:将 FITC 在应适当守护祛除后易溶 DMF,并在 pH ~9.0–9.5 的弱碱必要条件下与脱守护的 N-端胺或 Lys ε-胺发生反应行成平稳的硫脲键;脱硅橡胶与纯化:响应达成后用 TFA 溶液裂解肽链并剔除庇护基,然后进行 反相 HPLC(C18 柱)纯化;服务质量研究核验:主要包括 MALDI-TOF 或 ESI-MS 填写团伙量,HPLC 显示信息饱和度 ≥95%;¹H-NMR 核验 FITC 化学式结构设计分解有没恰当。3. 技术优化要点
FITC 偶联*好在固相肽制作而成已完成后立马实现,禁止 FITC 在含酸性裂解中发生了环化造成的表现减弱;Ahx 链或 β-Ala 等精短 spacer 为保护才能减少环境干涉,提高自己藕合热效率;体现不要光照度、氧化物,提案阴凉在 4 °C 储放,烘干保存文档。4. 表征与应用
荧光光谱仪检查:FITC 培养约 495 nm,试射约 519 nm;也可以于荧光显微、流式细胞定量分析等公司加测;靶向治疗治疗手机效验:在髓鞘挫裂伤型号中侵入 FITC-CAQK,极好察其在病灶 ECM 中的积累,手机效验 CAQK 的靶向治疗治疗特质;比较稳相关性检测:评诂在血夜、PBS 电视媒体中的荧光比较稳相关性与进行分解现象;用量与荧光效果校正:实现标准化弧线精确测量荧光效果与肽渗透压关联。出产地:上海pg电子娱乐游戏app 生物体
作用:研究
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