AF488 Tetrazine（Alexa Fluor 488 Tetrazine）是将高性能绿色荧光染料Alexa Fluor 488（AF488）与活性四嗪基团（tetrazine）通过共价键连接得到的一种生物正交荧光标记试剂。
它切合了高精确度度、光稳定性的荧光性能指标和四嗪的快怪物学正交作用力量，丰富软件应用于蛋白质含量质、核酸、脂质及納米文件的非特异朋友标注、成相与团伙示踪，是现在电化学与怪物学交叉点论述范围的期望辅助工具。构造组建与首要本质AF488 Tetrazine由二个管理的本质区域分为：Alexa Fluor 488染料
Alexa Fluor 488是一种明亮的绿色荧光染料，激发峰位于约495 nm，发射峰约519 nm，具有高量子产率、光稳定性和水溶性，常用于荧光显微成像、流式细胞术等。其荧光性能优于传统的FITC等染料，能在生物样本中产生高对比度、低背景的图像。
四嗪（Tetrazine）官能团
四嗪是一种含四个氮原子的芳香杂环化合物，在生物正交化学中被广泛应用。AF488所连接的通常是6-位取代的1,2,4,5-四嗪衍生物，它能与应变烯烃类底物（如TCO、BCN、DBCO等）通过逆电子需双烯（IEDDA）反应快速共价结合，反应速率高达10⁴–10⁶ M⁻¹·s⁻¹，无需催化剂即可在生理条件下进行，且具有选择性和效率。
生物正交反应性能卓越
AF488 Tetrazine可与TCO（trans-cyclooctene）、BCN（bicyclononyne）等底物在水相环境下迅速发生点击式IEDDA反应。该反应不干扰细胞代谢或其他官能团，不需要铜离子等催化剂，适合活细胞和体内环境使用。
高荧光亮度与稳定性
AF488的荧光信号强、抗光漂白性能优异，可在激光共聚焦显微镜和流式细胞仪中获得高质量图像，特别适用于活细胞或组织的实时成像和长时间观察。
水溶性好，易于操作
该分子在水溶液中具有良好溶解度，适合各种缓冲液体系，能直接用于生物样本的标记与反应，无需复杂的有机相操作。
共价结合，信号稳定
AF488 Tetrazine与目标TCO修饰分子发生反应后，形成稳定的共价键，染料不会游离或脱落，确保信号持久性和重复性。
生物分子标记
AF488 Tetrazine可用于与TCO修饰的蛋白质、抗体、寡核苷酸、肽链等共轭，实现特异性荧光标记和定量分析。例如，已TCO化的抗体或探针可在加入AF488 Tetrazine后实现荧光标记，用于免疫检测或靶向成像。
活细胞成像
由于反应条件温和、无毒副作用，该试剂适合用于活细胞荧光标记，包括膜蛋白、糖类修饰物或代谢标记物的特异性检测。
点击化学示踪
AF488 Tetrazine可以标记TCO修饰的小分子探针或代谢物，适用于药物递送系统、分子运输路径研究及细胞内示踪实验。
组织成像与活体成像
在动物模型中，AF488 Tetrazine可用于TCO修饰抗体或纳米颗粒的体内标记，实现组织分布成像和病灶定位。
多重标记实验
可与不同颜色的Tetrazine或其他正交标记试剂（如Azide、NHS等）组合，用于多通道、多靶点荧光实验，提高分析通量。
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