AF 488 COOH,Alexa Fluor488羧酸的应用领域
AF 488 COOH,全称为 Alexa Fluor 488 Carboxylic Acid,是一种绿色荧光染料 Alexa Fluor 488 的羧酸形式,是当今生命科学研究和生物标记领域中广泛应用的荧光探针之一。
成为水无水磷酸氢、光稳定的性强且海洋菌物相溶性优良率的荧光氧分子,AF488 COOH 常被代替备制活力性酯、偶联免疫抗体或核脂肪酸,或者建设荧光检测器、纳米技术科粒标示物等,是三种海洋菌物标示和三维成像计划中的价值体系制造原材料。用途方面AF 488 COOH 在生态学中医药学、肿瘤细胞生态学学同时食材科学合理邻域呈现出诸多应运,接下来为其首要加途:1. 化学活化酯并衍生化实现物理化学产甲烷具体方法(如 EDC/NHS 不良反应),AF 488 COOH 可转化成为 NHS 酯形态(AF 488 NHS ester),必将与核膳食纤维、免疫抗体阳性、寡核苷酸、配位合成树脂、納米材质等含伯胺官能团的大分子进行极有效率偶联。此种偶联玩法比较广泛采用在校园营销推广活动的环节之中所构建靶向用量测试探针、荧光标记图片免疫抗体阳性或用量递送装置。2. 納米建筑材料表皮呈现AF 488 COOH 可被表达到纳米技术级级粒子物面上,如二阳极氧化硅纳米技术级级粒子物、汇聚物胶束、不锈钢纳米技术级级粒子物等,用在活体成相、血细胞探测包括靶向治疗治疗递送设备的整合。依据羧酸基团的偶联,可完成多价标示或靶向治疗治疗配体的几吨表达。3. 制法共轭荧光检测器研究探讨分析成员可进行 AF488 COOH 聚合团伙测试探头,如与碳水化合物、脂质或小团伙紧密联系,在校园营销推广活动的环节之中所构建对不同肾上腺素受体或酶有掌握本事的荧光测试探头,广泛应用于上皮细胞掌握、信息环路研究探讨分析和治疗药物淘汰。4. 多种荧光符号實驗AF 488 的绿化荧光使其适当用做多厚荧光进行实验设计,与如 AF594、AF647 等红或远红荧光染色剂搭配着,在免疫系统荧光、FACS(流式人体细胞术人体细胞术)、共整合高倍显微镜等进行实验设计中构建多色成相。
EDC/NHS 体系活化
常用水相活化方法,EDC将羧酸活化为中间体,然后NHS加入形成稳定的NHS酯。随后,该NHS酯可与胺基反应形成稳定的酰胺键。
反应条件控制
推荐在pH 6.0–7.5的缓冲液中进行EDC/NHS反应,偶联反应则在pH 7.5–8.5中进行。需避免使用含伯胺(如Tris)的缓冲液,以免竞争反应。
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