AF488 NHS,Alexa Fluor 488活性酯的偶联反应机制
AF488 NHS Ester,即 Alexa Fluor 488 N-羟基琥珀酰亚胺酯,是一种基于高性能荧光团Alexa Fluor 488的活性酯标记试剂。Alexa Fluor 488(简称AF488)属于磺基荧光染料家族,是一种具有优异光学性能和化学稳定性的绿色荧光染料。
NHS酯的活力节构使其可能高效能地与蛋白酶质、肽、免疫力抗体、核酸等生态学分子式的伯胺基团行成共价键,广泛的应该用于生态学符号、人体癌细胞激光散斑、流式癌细胞术人体癌细胞术及免疫力解析等理论研究方向。偶联影响逻辑AF488 NHS Ester采用其几丁质酶的NHS酯基团与靶原子核中的伯胺基团(如球营养素中赖氨酸侧链的氨基)开始亲核转变成发生反应,生产不稳的酰胺键,改变共价标上。不起作用生活条件:普通在pH 7.4–8.5的降低液(如PBS、碳酸氢盐降低液)中进行影响事件:在常温下影响60分钟的英文至1小响应特别:有效率、从一而终,响应清新,尽量不要靶分子式型式损害要留意要点:反应迟钝历程中应制止游离子氨基和所需的水分过度避免NHS酯蛋白质水解蛋白质标记
AF488 NHS Ester可标记蛋白质上的赖氨酸残基,用于免疫荧光染色、蛋白定位、Western blot分析和亲和纯化。
抗体偶联
标记一抗或二抗,获得荧光抗体,广泛应用于免疫组化(IHC)、免疫荧光(IF)及流式细胞术(FACS)。
核酸探针制备
与含氨基修饰的寡核苷酸结合,制备高灵敏度的荧光探针,用于荧光原位杂交(FISH)和PCR探针。
细胞成像
利用其绿色荧光信号标记细胞膜、胞器或特定蛋白,实现多色荧光共聚焦显微镜成像。
生物传感器和分子相互作用
标记分子用于研究蛋白-蛋白、蛋白-核酸等生物大分子的相互作用及动力学。