AF488 NHS,Alexa Fluor 488活性酯的偶联反应机制
AF488 NHS Ester,即 Alexa Fluor 488 N-羟基琥珀酰亚胺酯,是一种基于高性能荧光团Alexa Fluor 488的活性酯标记试剂。Alexa Fluor 488(简称AF488)属于磺基荧光染料家族,是一种具有优异光学性能和化学稳定性的绿色荧光染料。
NHS酯的活性酶类空间结构使其可高质量地与淀粉酶质、肽、抗原、核酸等生态学体大碳原子的伯胺基团造成共价键,丰富运用于生态学体标注、細胞三维成像、免疫力印迹細胞术并且 免疫力解析等钻研各个领域。偶联想法策略AF488 NHS Ester运用其催化活性的NHS酯基团与靶原子核中的伯胺基团(如核核苷酸中赖氨酸侧链的氨基)参与亲核改变影响,形成比较稳定的酰胺键,实现了共价标出。想法状况:往往在pH 7.4–8.5的储存液(如PBS、碳酸氢盐储存液)中开始现象时段:室内温度下现象30几分钟至1小影响基本特征:便捷、缜密,影响清新,减少靶分子式的结构伤害主意要点:化学反应进程中应预防游离于氨基和水份异常以防止NHS酯水解反应
蛋白质标记
AF488 NHS Ester可标记蛋白质上的赖氨酸残基,用于免疫荧光染色、蛋白定位、Western blot分析和亲和纯化。
抗体偶联
标记一抗或二抗,获得荧光抗体,广泛应用于免疫组化(IHC)、免疫荧光(IF)及流式细胞术(FACS)。
核酸探针制备
与含氨基修饰的寡核苷酸结合,制备高灵敏度的荧光探针,用于荧光原位杂交(FISH)和PCR探针。
细胞成像
利用其绿色荧光信号标记细胞膜、胞器或特定蛋白,实现多色荧光共聚焦显微镜成像。
生物传感器和分子相互作用
标记分子用于研究蛋白-蛋白、蛋白-核酸等生物大分子的相互作用及动力学。


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