常用名 4’-胺甲基荧光素盐酸盐
英文名 4-(AMINOMETHYL)-3',6'-DIHYDROXY-3H-SPIRO[ISOBENZOFURAN-1,9'-XANTHEN]-3-ONE HYDROCHLORIDE
CAS号 91539-64-9
分子量 397.80800
分子式 C21H16ClNO5
熔点 N/A
化学结构
AMF的核心结构为荧光素骨架,化学式为C21H15NO5,分子量约为365.34。其分子在4位碳原子上连接有一个氨甲基侧链,赋予分子一个自由的初级胺基团。该胺基能与多种活性酯、异硫氰酸酯等官能团高效反应,便于与生物分子偶联。
物理性质
AMF为橙黄色或淡黄色固体,具有良好的水溶性,能在水及多种有机溶剂中溶解。其在约490 nm波长激发下发射明亮的绿色荧光,发射峰在515-520 nm左右,荧光强度高,量子产率优良。
光稳定性与pH敏感性
荧光素类染料普遍存在一定的pH依赖性,AMF在pH 6-8的缓冲体系中荧光最为稳定且强烈。其光稳定性较好,适合多次激发和长时间成像应用。
生物分子标记
AMF常用作蛋白质、多肽、抗体及核酸探针的荧光标记剂。通过其氨基官能团,可与活性酯类或异硫氰酸酯基团的试剂共价结合,形成稳定的标记物,适用于免疫组化、免疫荧光及分子杂交等实验。
细胞成像和流式细胞术
AMF标记的分子能够穿透细胞膜或结合细胞表面特异性分子,提供细胞定位、动态监测和定量分析的荧光信号,广泛用于细胞生物学和药物筛选研究。
免疫分析
作为免疫分析的荧光探针,AMF能灵敏检测抗原-抗体反应,配合酶联免疫吸附测定(ELISA)、免疫沉淀和西方印迹等技术,增强信号的可见化和定量准确性。
核酸杂交探针
可标记寡核苷酸,实现高灵敏的荧光原位杂交(FISH)和北方杂交(Northern blot),方便基因表达定位与检测。
荧光传感器开发
AMF的荧光性质使其成为开发金属离子、pH、氧气等环境因素传感器的理想染料,实现环境变化的实时检测。