海洋生物素标识猪去氧胆酸（Biotinylated Hyodeoxycholic Acid）：组成、性能特点与适用探讨

一、前言

胆汁酸是高密度脂蛋白代谢率的通常产品的一种，在脂类消化不良降解、直肠菌群调低及网络信号转导中树立注重功用。猪去氧胆酸（Hyodeoxycholic Acid, HDCA） 也是种在猪胆汁中含碳量较高的二羟基胆汁酸，具差异化的的空间构型与疏水-亲水区域划分基本特征，在直肠降解及胆汁酸感觉促活中特征出层次性的动物学亲水性。

将 HDCA 与生物技术技术素（Biotin）碳原子偶联，可获取生物技术技术素标出猪去氧胆酸（Biotinylated HDCA）。那样检查是否体现不但开展了 HDCA 的胆汁呈酸性质，还传递其与亲和素（Avidin/Streptavidin）体系中的高特情人配合力量，导致保证 了对胆汁酸主动的功效的web3d、提取与高快速检则。

二、氧分子设备构造与优点

1. 猪去氧胆酸（HDCA）性能

HDCA 应归 C₂₄ 胆汁酸，骨架由甾体四环结构的（环 A-D）组合而成，C-3 与 C-6 位有羟基，C-17 位扩展出含羧基的皮脂链。其疏水性树脂比较强，但在偏碱性状况下羧基阴离子化，可混溶水相生态。

2. 动物素（Biotin）的特点

生物体素不是种包含有 双环咪唑烷酮环与戊酸侧链 的各种维生素D（各种维生素D H/B₇），就可以与亲和素或链霉亲和素以 Kd≈10⁻¹⁵ M 的高自己的亲和力整合，整合期间近乎不逆。

3. 菌物素记号胜机

实现在 HDCA 上传入生态学素商品标签，就可以巧用亲和素管理体系实行固定好化、监测或纯化。这一种升级改造需要最适合研究探讨胆汁酸-感觉互相的作用、肠子菌群分解代谢还有胆汁酸轉運蛋白酶活性酶。

三、提炼对策

怪物素记号 HDCA 的内在是将 HDCA 氧分子上的羧基或羟基与怪物素的可偶联位点对接。先进典型转化成自驾线路下面：

1. 羧基滋养法（EDC/NHS 方式）

进行：

在无水充分稀释剂（如 DMF、DMSO）中，应用 1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺（EDC）活性 HDCA 的羧基。

参与 N-羟基琥铂酰亚胺（NHS）转为 NHS 酯。

将氨基淡化的微生物素（Biotin-NH₂）接入，行成安全稳定的酰胺键偶联物。

优缺点：作用状态性情温和，劳动生产率高，偶联位点明显。

2. 羟基呈现法

若选泽在 C-3 或 C-6 羟基具体位置传入菌物素，可先将菌物素诞生化成催化活性炭酸酯（如 Biotin-NHS carbonate），再与 HDCA 产生酯化响应。类似这些方法留下了 HDCA 羧基，适于必须要 保持胆汁弱酸性生长的科学研究。

3. 接线头分子结构（Linker）注入

只为下降立体式位阻并加强联系成功率，基本在 HDCA 与菌物素当中加进 聚乙二醇（PEG）链段 或烷基链（如 C₆、C₁₂），造成 Biotin-PEGn-HDCA，加强在亲和素接触面的能够达到性。

四、生物学生物质地

原子核量：约 700–1000 Da（考量于 linker 的段长度）

容解性：在有机物相转移催化剂（DMSO、DMF、甲醇）中正常，一些繁衍物在 PBS 中可溶。

动态平衡性：缺水、遮光、高温（–20 ℃）情况下动态平衡，水硫酸铜溶液中需短时运行以减少油脂水解。

组合特征参数：与亲和素类核蛋白组合在短时间且最牢，可以选择于多轮过柱测试。

五、菌物药学用

1. 胆汁酸蛋白激酶探讨

HDCA 是法尼醇 X 肾上腺素多巴胺肾上腺素受体（FXR）与膜型胆汁酸肾上腺素多巴胺肾上腺素受体（TGR5）的非天然配体之五。能够 怪物素符号，设计者可采用 怪物素-亲和素磁珠 生物富集联系蛋清，讲解肾上腺素多巴胺肾上腺素受体与配体的联系位点与干劲学。

2. 直肠菌群基础代谢了解

肠胃菌群可对胆汁酸展开去羟基化、硫化回归等反响。生物工程素化 HDCA 可当为检测器，定位跟踪其在菌群基础分解时中的转换终产物，经由亲和猎取与质谱联用分享基础分解方式。

3. 胆汁酸转化蛋白质（ASBT/OATP）功能模块的检测

在肿瘤细胞模板中，生态学素图标 HDCA 可以用于探索胆汁酸轉運淀粉酶的底物特女性朋友和轉運数率，匹配荧光或蔓延性图标满足多方面在线检测。

4. 抗癫痫药物递送系统

HDCA 型式与内部膜脂质的彼此效果强大，用做为媒介靶向药物内脏器官与肠胃。生物体素化后，可应用亲和素掩盖的微米粒子束或脂质体完成 多巴胺受体介导的定向生递送。

5. 大分子成相

若进十步在亲和素上联系荧光测试探针或射线性示踪剂，生物体素化 HDCA 可达成 体内的胆汁酸区域与分泌的成相评估。

六、实验室留意法定程序

不起作用具体状况控住：EDC/NHS 不起作用要在强弱酸至一般的中性具体状况（pH 5.5–7.5）使用，以提高偶联成功率。

纯化：可采用了反相 HPLC 或妇科凝胶净化取除自由生态学素和副结果。

探测：可用质谱（ESI-MS, MALDI-TOF）判定碳原子量与偶联情况。

同步保存：常温、干燥粉未需 –20 ℃ 阴凉同步保存，不要土壤含水量和亮光。

七、优缺点与片面性的只

优势与劣势

超宽亲合力根据，方便于获取靶标

使用 HDCA 生态学活性氧，可做出模块探析

物理分解比较稳定，纯性强、批号比较稳定义好

片面性

生物体素化可能会变更 HDCA 的疏水溶性与多巴胺受体亲和性

在休内探索中，动物素标示几率的影响胆汁酸的轉運与新陈代谢方式

八、明天發展方法

可割切接连

在 HDCA 与生物制品工程素左右运用可生物制品工程吸附或光敏水刀切割的 linker，满足标上后不可逆转宣泄，抑制空间结构掩盖对的功能的损害。

多模态测试探针

切合荧光、磁震动或核临床医学示踪，完成多模态影像与功能表解析。

的结构提升

生命的进化区别的位置和链长的生物学制品素掩盖对 HDCA 生物学制品活性酶类的直接影响，搭建更高的非特异朋友、更低骚扰的电极。

九、结论怎么写

微怪物方式素箭头猪去氧胆酸就是一种还兼有胆汁酸微怪物方式效果与混凝土泵送亲和捕捉效果的分子式探头。用化学上偶联方式，将微怪物方式素的可掌握性与 HDCA 的多巴胺感觉靶向疗法性综合，可兼有广泛性操作于胆汁酸核心代谢科学学习、多巴胺感觉效果介绍、胃肠菌群功效考核机制打磨或者用量递送系統设计方案。渐渐分解方式和监测方式的的进步，这样探头在核心科学学习与临床药理有效的转化泉河兼有广阔的未来发展。